[发明专利]一种促人血小板生成素表达载体及其构建方法无效
| 申请号： | 200810086477.0 | 申请日： | 2002-07-13 |
| 公开（公告）号： | CN101250553A | 公开（公告）日： | 2008-08-27 |
| 发明（设计）人： | 曾溢滔;宁云山;黄淑帧;王小宁 | 申请（专利权）人： | 上海医学遗传研究所;中国人民解放军第一军医大学;上海滔滔转基因工程股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/12 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 | 代理人： | 缪利明 |
| 地址： | 200040上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 血小板 生成 表达 载体 及其 构建 方法 | ||
1、一种促人血小板生成素hTPO表达载体，其特征在于，所述表达载体包括含有内含子V的hTPO cDNA，并且利用山羊β-酪蛋白启动子指导所述含有内含子V的hTPO cDNA的表达。
2、如权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述内含子V具有SEQID NO：1所示第4891-5127位的核苷酸序列。
3、如权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述hTPO cDNA具有SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列。
4、如权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述山羊β-酪蛋白启动子具有SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列。
5、如权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体还包括CMV启动子。
6、一种如权利要求1所述载体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
A、PCR扩增hTPO cDNA片段，并将hTPO内含子V片段插入hTPO cDNA中，构建成含内含子V的hTPO cDNA真核表达载体；
B、将山羊β-酪蛋白启动子插入hTPO cDNA的5’端，构建成由CMV启动子、山羊β-酪蛋白启动子共同启动的含有内含子V的hTPO cDNA的表达载体。
7、如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤A的hTPO cDNA片段具有SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列。
8、如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤A的hTPO内含子V片段具有SEQ ID NO：1所示第4891-5127位的核苷酸序列。
9、如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤B的山羊β-酪蛋白启动子具有SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列。
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