[发明专利]检测磺胺甲噁唑残留的免疫胶体金试纸条及其制备方法无效
申请号: | 200810089431.4 | 申请日: | 2008-03-31 |
公开(公告)号: | CN101245338A | 公开(公告)日: | 2008-08-20 |
发明(设计)人: | 吴国娟;沈红;裴兆柱;郭玮;张中文;陆彦 | 申请(专利权)人: | 北京农学院 |
主分类号: | C12N5/18 | 分类号: | C12N5/18;C07K16/18;G01N33/577;G01N33/558 |
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地址: | 102206北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 磺胺 甲噁唑 残留 免疫 胶体 试纸 及其 制备 方法 | ||
1、一种杂交瘤细胞系A-7-1,其保藏号为CGMCC No.2411。
2、一种能专门识别磺胺甲噁唑的单克隆抗体,它是由权利要求1所述的杂交瘤细胞系所分泌的。
3、含权利要求1或2的试纸条。
4、权利要求3所述的试纸条,其特征在于,所述的试纸条是检测磺胺甲噁唑残留的试纸条。
5、一种适用于检测磺胺甲噁唑残留的试纸条,它包括样品垫(1)、结合垫(2)、硝酸纤维素膜(3)、吸水垫(4)和PVC背衬(7),其特征在于,在PVC背衬(7)上按顺序依次粘附有样品垫(1)、结合垫(2)、硝酸纤维素膜(3)、吸水垫(4);所述的结合垫(2)上包被有所述的抗磺胺甲噁唑单克隆抗体-胶体金标记物;所述的硝酸纤维素膜(3)上分别包被有磺胺甲噁唑-载体蛋白偶联物构成的检测线(5)和兔抗鼠IgG构成的质控线(6)。
6、权利要求5所述的试纸条,其特征在于,所述的载体蛋白是卵清蛋白。
7、权利要求5或6所述的一种适用于检测磺胺甲噁唑残留的免疫胶体金试纸条的制备方法,其步骤包括:
1)将磺胺甲噁唑与载体蛋白偶联,形成磺胺甲噁唑-载体蛋白偶联物;
2)用磺胺甲噁唑-载体蛋白偶联物免疫小鼠,得到分泌抗磺胺甲噁唑的单克隆抗体的细胞系,其保藏号为CGMCC No.2411;
3)提取免疫小鼠IgG免疫健康家兔,得到兔抗鼠IgG抗体;
4)用柠檬酸三钠与氯金酸反应制备胶体金;
5)将步骤2)制备的抗磺胺甲噁唑单克隆抗体加入步骤3)制备的胶体金中,得到抗磺胺甲噁唑单克隆抗体-胶体金标记物;
6)将抗磺胺甲噁唑单克隆抗体-胶体金标记物包被在结合垫(2)上;
7)将磺胺甲噁唑-载体蛋白偶联物包被在硝酸纤维素膜(3)上构成的检测线(5);并将制备得的兔抗鼠IgG包被在硝酸纤维素膜(3)上构成的质控线(6);
8)在所述的PVC背衬(7)上按顺序依次粘附有样品垫(1)、结合垫(2)、硝酸纤维素膜(3)、吸水垫(4),得到所述的检测磺胺甲噁唑残留的免疫胶体金试纸条。
8、权利要求7所述的制备方法,其中,步骤2)所述的载体为人血清白蛋白。
9、权利要求7所述的制备方法,其中,步骤6)所述的载体为卵清蛋白。
10、权利要求3-6任一项所述的试纸条在检测磺胺甲噁唑残留中的应用。
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