[发明专利]脊髓灰质炎疫苗

说明书

技术领域

本发明涉及生物制药领域，具体地说，本发明涉及一种脊髓灰质 炎疫苗。

背景技术

接种脊髓灰质炎疫苗是预防脊髓灰质炎病毒感染的最主要途径。 通过使用口服减毒脊髓灰质炎疫苗，我国已经完全消灭了野生型病毒 导致的脊髓灰质炎，但是仍存在疫苗株变异引起的疫苗相关病例。灭 活脊髓灰质炎疫苗是一个包括脊髓灰质炎病毒血清型I型、II型和III 型的三价疫苗。由于我国已经没有野毒株流行，所以只能使用免疫原 性较弱的Sabin减毒株来研制灭活脊髓灰质炎疫苗。这种灭活疫苗的 免疫效果差，产量低，价格昂贵，因此不可能作为计划免疫疫苗在全 国范围内大规模使用。

目前发达国家均使用以野毒株为毒种生产的灭活脊髓灰质炎疫 苗。通过这一疫苗已消灭了野生型病毒导致的脊髓灰质炎，而且也不 存在减毒疫苗引起的疫苗相关病例。但是这一疫苗价格更为昂贵，无 法在我国以及其它发展中国家和不发达国家大规模使用。因此，为了 在全球范围内彻底消灭脊髓灰质炎病毒，有必要研制一种高效低价的 新型灭活脊髓灰质炎疫苗。

专利文献1 WO2006063152A2公开了一种提高TLR8介导的生物 活性的免疫刺激组合物，该免疫刺激组合物包含胺类化合物和寡核苷 酸，并且该组合物可以作为佐剂联合活性病毒、细菌、灭活病毒等材 料用于预防肝炎、脊髓灰质炎等疾病。该专利文献并未给出仅仅使用 寡核苷酸作为佐剂可以联合活性病毒、细菌、灭活病毒等材料用于预 防肝炎、脊髓灰质炎等疾病的技术启示，而且其中的免疫刺激组合物 是提高TLR8介导的生物活性，对于TLR9介导或其它途径介导的生 物活性是否有影响在该专利文献中并未提及。专利文献2 CN1637013A公开了一种具有改善的免疫调节功能的经修饰的CpG 寡聚脱氧核苷酸，其是在ODN的3’-末端偶联连续的胸腺嘧啶脱氧核 糖核苷(dT)序列。专利文献3 CN1781930A公开了一种佐剂，该佐 剂至少包含一个含CpG二核苷酸的单链脱氧核苷酸，该佐剂与乙型 肝炎病毒疫苗联合应用时，能够显著增强乙型肝炎病毒疫苗的免疫效 果。文献《中华医学杂志》第82卷第8期中综述了CpG寡脱氧核苷 酸作为人用疫苗佐剂的初步研究。但是这些文献均未涉及灭活的脊髓 灰质炎病毒作为抗原单独与含有至少一个非甲基化CpG二核苷酸的 寡聚脱氧核苷酸(所述寡聚脱氧核苷酸的长度为15-35个核苷酸)的 第一佐剂的联合作用。

发明内容

本发明的目的是要提供一种新型灭活脊髓灰质炎疫苗，具体地 说，本发明提供一种提高疫苗的免疫效果、降低疫苗抗原的用量并降 低疫苗成本的灭活脊髓灰质炎疫苗。

为了实现本发明的目的，本发明提供一种脊髓灰质炎疫苗，其 包含灭活的脊髓灰质炎病毒和第一佐剂，该第一佐剂为含有至少一个 非甲基化CpG二核苷酸的寡聚脱氧核苷酸，其化学本质为人工合成 的含有CpG二核苷酸的寡聚脱氧核苷酸(简称CpG-ODN)，该寡聚 脱氧核苷酸的长度为15-35个核苷酸，优选为20-30个核苷酸，更优 选为20-25个核苷酸。

在本发明的一个实施方案中，每剂疫苗中优选包含灭活的脊髓 灰质炎病毒0.1μg～1mg，并包含第一佐剂10μg～10mg。根据本发 明，更优选的是，每剂疫苗中包含第一佐剂100μg～1mg。

根据本发明，所述寡聚脱氧核苷酸其序列中优选具有两个或两 个以上拷贝的5’-NTCGTT-3’基元，且其长度为15～35个核苷酸，其 中所述CpG是非甲基化的，并且所述N不代表A或G。更优选的是， 所述寡聚脱氧核苷酸序列中5’-末端为T，其后为3～8个，优选5～7 个CGTT串联重复的寡聚脱氧核苷酸。本发明的另一个实施方案为 TCGTT串联重复3～8次，优选5～7次的寡聚脱氧核苷酸。

在本发明的另一个实施方案中，所述CpG-ODN的核苷酸序列优 选为：

5’-TCGTTCGTTCGTTCGTTCGTT-3’

5’-TCGTTCGTTCGTTCGTTCGTTCGTT-3’

5’-TCGTTCGTTCGTTCGTTCGTTCGTTCGTT-3’

5’-TCGTTTCGTTTCGTTTCGTT-3’

5’-TCGTTTCGTTTCGTTTCGTTTCGTT-3’

5’-TCGTTTCGTTTCGTTTCGTTTCGTTTCGTT-3’。