[发明专利]珠体组、珠体组的制造方法和珠体组的使用方法

说明书

相关申请的交叉引用

本发明包含于2007年5月10日和2007年6月27日向日本专 利局提交的日本专利申请JP 2007-125273和日本专利申请JP 2007-168866的主题，其全部内容结合于此作为参考。

技术领域

本发明涉及一种在生化分析技术中特别有用的新型技术。更具 体地，本发明涉及一种能够通过新型方法进行各个珠体的识别的珠 体组、珠体组的制造技术和关于该珠体组的应用技术。

背景技术

在生化技术等领域中，在某些情况下可以使用通常称为“珠体 (微珠)”的微粒载体。作为珠体最广泛采用的生化应用，可列举 的有使用硅石珠体或聚合物珠体作为用于液相色谱法的分离柱中 的填充材料。

通过使珠体的表面结合抗体、抗生物素蛋白等，还可以使其用 于从生物样品中捕获、分离、精制目标物质等。例如，将其上已预 先固定了对蛋白质中的特定氨基酸序列的抗体的珠体混合在细胞 提取液中以捕获目标蛋白质(或其复合体)的方法已成为用于分析 蛋白质的相互作用的有用方法(ISOBE，Toshiaki和TAKAHASHI， Nobuhiro：“Extra Issue-Experimental Lecture 2 for Postgenome Age， Proteome Analysis Methods”，p.166-174，2000，Yodosha Co.，Ltd.)。

还已知有使用“磁性珠体”的方法。可以举出使用其上已固定 有针对微生物抗原的抗体的磁性珠体来通过抗原-抗体反应从样品 中捕获和检测目标微生物的例子(日本专利公开第2006-017554和 2001-004631号等)。还已经提出了另一种方法，将磁性珠体与微通 道系统组合以进行细胞的分离(日本专利公开第2006-006166号)。

又已经提出了另一种方法。根据该方法，允许在珠体表面进行 物质间的相互作用(例如杂交)。然后，为了分析物质间的相互作 用存在与否，向相互作用的位置施加电场，从而使珠体根据保持在 珠体上的各物质电荷量(库仑力)而迁移(日本专利公开第 2003-302373号)。

此外，分析技术已经建立了实际应用，其中，使用了可以通过 根据两种荧光染料不同比例的组合区分从各种珠体发出的光的颜 色一种一种地区分这些不同种的珠体的珠体组(最多由多达100种 珠体组成)(“LUMINEX”系统(注册商标)；访问 http://hitachisoft.jp/dnasis/luminex/microbead/beads.html)。然而，因 为不同种珠体是根据发光强度的不同区分的，所以该方法需要精确 地检测发光。

发明内容

如上所述，目前在生化领域对珠体的应用技术的开发仍在进行 中，并期待其应用在未来进一步扩展。

另一方面，对可以在各种生化分析技术的领域促成高速化、综 合分析的实现、效率的提高、精度的提高等新型技术有突出的需求。 例如，主要的技术需求包括在DNA序列技术中的读取时间的高速 化、以及在药物筛选技术中工作效率的提高。近年来，已报道了不 编码蛋白质的核糖核酸(RNA)存在并控制蛋白质的功能，并且已 提出某些DNA片段充当了风湿病发病的原因。因此，对用于细胞 中作为片段存在的DNA或RNA序列的综合和高精度检测中的技术 有突出的需求。

希望提供可以满足上述技术需求的新型生化分析技术。更具体 地，本发明的主要需求是提供一种能够显著增加可一种一种地区分 的各种珠体的数量的珠体识别技术，以及利用珠体识别技术的应用 分析技术。

在本发明的一个实施例中，因此提供了一种由多个珠体子组组 成的珠体组，其中，每个子组中的珠体每个都设置有允许参与预定 的对应反应或相互作用的物质固定在其上的表面，并且，在所述珠 体组中的所述各个珠体分别设置有不同的物理要素，以便所述珠体 组中的所述各个珠体可以通过计算机分析在所述珠体组中的所述 各个珠体的拍摄图像而被分成所述多个子组。珠体的外形、珠体核 心部分的外形、标识符等可以作为物理要素的例子。应注意，本文 广泛使用的术语“反应或相互作用”表示了化学结合(包括物质间 的非共价结合、共价结合和氢键结合)和离解，并且例如，广泛地 包括诸如作为核酸(核苷酸)之间的互补结合，以及大分子-大分子、 大分子-小分子和小分子-小分子的结合或离解的杂交的特定结合或 离解。