[发明专利]一株高光学纯度D－乳酸生产菌及其发酵生产D－乳酸的工艺

权利要求书

1、一株高光学纯度D-乳酸生产菌，分类命名为芽孢乳杆菌Sporolactobacillussp.Y2-8，其保藏登记号为CCTCC No：M 208052。

2、利用权利要求1所述芽孢乳杆菌Sporolactobacillus sp.Y2-8发酵生产D-乳酸的工艺，包括平板培养、种子培养和发酵产酸，其特征在于：在厌氧条件下进行平板培养和种子培养后，通过在发酵罐中通入惰性气体的方式进行发酵产酸，使工艺过程全程厌氧进行。

3、根据权利要求2所述芽孢乳杆菌Sporolactobacillus sp.Y2-8发酵生产D-乳酸的工艺，其特征在于：

(1)平板培养：将芽孢乳杆菌Y2-8接种至平板培养基厌氧培养，培养温度30～40℃，培养时间20～36h；

(2)种子培养：将平板培养的芽孢乳杆菌Y2-8接种到种子培养基中进行厌氧培养，培养温度30～40℃，培养时间12～18h；

(3)发酵产酸：将种子培养液接种到发酵培养基中进行产酸发酵，直接以淀粉类糖化液为碳源，接种量为5％～10％(v/v)，发酵温度30～40℃，以总流速每升培养基0.6～2L/min量通入惰性气体，采用中和剂将发酵体系pH控制在5.0～7.0，发酵72～120h。

4、根据权利要求2和3所述芽孢乳杆菌Sporolactobacillus sp.Y2-8发酵生产D-乳酸的工艺，其特征在于所述的平板培养基重量百分配比为葡萄糖10～15％，酵母膏0.1～0.3％，无水乙酸钠0.2～0.5％，无水硫酸镁0.01～0.05％，磷酸二氢钾0.1～0.3％，琼脂1.8％，水余量，pH7.0。

5、根据权利要求2和3所述芽孢乳杆菌Sporolactobacillus sp.Y2-8发酵生产D-乳酸的工艺，其特征在于所述的种子培养基的碳源包括浓度为2％～5％的葡萄糖、玉米糖化液中的一种或两者的混合物；氮源及生长因子包括浓度为0.2％～1.0％的酵母膏、蛋白胨、牛肉膏、玉米浆、麸皮中的一种或多种的混合物；无机离子重量百分配比为无水硫酸镁0.01～0.05％，硫酸亚铁0.001～0.005％，硫酸锰0.001～0.005％，碳酸钙1.5～3％，水余量，pH7.0。

6、根据权利要求2和3所述芽孢乳杆菌Sporolactobacillus sp.Y2-8发酵生产D-乳酸的工艺，其特征在于所述的发酵产酸培养基的碳源包括浓度为10％～18％的葡萄糖、玉米糖化液中的一种或两者的混合物；氮源及生长因子包括浓度为0.2％～2.0％的尿素、硫酸铵、氨水、酵母膏、蛋白胨、牛肉膏、玉米浆、麸皮中的一种或多种的混合物；无机离子重量百分配比为无水硫酸镁0.01～0.1％，硫酸亚铁0.001～0.01％，硫酸锰0.001～0.01％，水余量，pH7.0。

7、根据权利要求2和3所述芽孢乳杆菌Sporolactobacillus sp.Y2-8发酵生产D-乳酸的工艺，其特征在于所述的种子培养阶段以2～3cm液体石蜡液封，或增大装液量的同时降低转速而实现厌氧培养。

8、根据权利要求2和3所述芽孢乳杆菌Sporolactobacillus sp.Y2-8发酵生产D-乳酸的工艺，其特征在于所述的种子培养阶段中可在摇瓶中添加玻璃珠，以增强传质效果。

9、根据权利要求2和3所述芽孢乳杆菌Sporolactobacillus sp.Y2-8发酵生产D-乳酸的工艺，其特征在于所述的发酵产酸阶段所用的中和剂包括NaOH、KOH、Na₂CO₃、CaCO₃、CaO、氨水、碳氨等一种或多种的组合。