[发明专利]直接榨汁与超声波结合提取仙人掌SOD的方法

权利要求书

1.以仙人掌茎片为原料，采用果蔬榨汁机直接破碎压榨取汁用于仙人掌SOD提取的方法。

将仙人掌清洗干净，晾干表面水份，根据榨汁机进料口对物料大小的要求，将茎片切分成适当大小的块状，以具有破碎压榨功能的榨汁机压榨取汁，滤掉粗渣，得到高黏稠度的仙人掌浆液。直接破碎压榨技术不需要添加任何缓冲液、水或溶剂，可以节省提取液消耗的成本和后续生产成本。

2.超声波处理降低浆液黏稠度并破碎细胞，提高出汁率和SOD提取率的方法。

仙人掌含有大量黏性多糖，直接破碎压榨出来的仙人掌浆液黏稠度极高，对此进行直接提取SOD难度极大。具有较高黏稠度的仙人掌浆液经20-25Mhz超声波处理，450W/20min。出汁率和SOD提取率均提高。

3.加热变性与硫酸铵盐析相结合进行SOD粗分离的方法

利用仙人掌SOD热稳定性高的特点，采用加热除变性与硫酸铵盐析相结合可以有效去除杂蛋白。经超声波处理后的浆液，以双层纱布滤除粗渣，再以5000rpm离心15min，去除沉淀。上清液加热到55-60℃维持20min，产生大量絮状物，冷却后再次离心5000rpm 15min，去除热变性的杂蛋白，上清液中加入硫酸铵至30％饱和度，充分溶解后，4℃冷藏静置2h以上，4℃8000rpm离心15min，去除沉淀；上清液中加硫酸铵至85％饱和度，4℃10000rpm离心20min，去净上清，以适量pH7.8磷酸盐缓冲液溶解沉淀。溶液经透过分子量为3500D的透析袋透析，透析液为pH7.8磷酸盐缓冲液，透析时间24h，其间换液3-4次。最后以聚乙二醇脱水浓缩得粗酶液。