[发明专利]十二烷基硫酸钠中和增菌肉汤

说明书

技术领域

本发明涉及一种十二烷基硫酸钠中和增菌肉汤，特别是一种十二烷基硫酸钠中和增菌肉汤的配方及其制备方法。其主要成分是胰蛋白胨、乳糖、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、水杨苷、土温-80、Triton X-100、甘氨酸、氯化钠、十二烷基硫酸钠、蒸馏水制备而成；用于中和水和食品中大肠杆菌检验。任何一个环境样品的增菌培养的实验，都必须有可靠的去除残余的消毒剂及抗菌因子的方法。不采用去除残余的消毒剂及抗菌因子措施的实验，应认为是在设计上的严重失误，依据这样的实验得出的结果是不可靠的。化学中和法是目前最常用的去除残余的消毒剂及抗菌因子方法，其优点是方法简单，使用方便，效果可靠。已有中和方法很多，常见的有酸、碱、吸附、稀释、离心、过滤等。上述均未经过严格的筛选并无法确定其使用浓度；对相应的消毒剂及抗菌因子不具有切实可靠的中和作用；中和剂本身或与消毒剂及抗菌因子反应的产物对样品微生物有杀灭或抑制其生长的作用；对培养成分有破坏作用，亦影响其物理性状。培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，就营养物质而言，一般不外乎碳源、氮源、无机盐、生长因子及水等几大类。在配制培养基时，根据各类微生物的特点，就可以配制出适合不同种类微生物生长发育所需要的培养基。培养基除了满足微生物所必需营养物质外，还要求有一定的酸碱度和渗透压。各类微生物对营养的要求不尽相同，因而培养基的种类繁多。培养基的制备程序方法，可因其种类不同而各异，即使同一种配方的培养基，各实验室及生产厂家也会根据各自的经验和原料质量的差异有所调整，因此，在配制之前，应先进行小量调配、预试，符合使用要求，再按确定的配方用料实施配制。试验工作者一直希望能有一种能克服上述不足的中和增菌肉汤，该培养基营养丰富，对接种少量大肠菌群可刺激其生长和产气。需氧芽孢杆菌则全被抑制，可直接用于吲哚试验，做吲哚试验时，应预先加入少量乙醚并震摇后，再加上一层吲哚试剂，不在震摇，视二液接触面有无紫红色出现，若不加乙醚，则易形成持久的乳化而干扰吲哚试验，这是因存在十二烷基硫酸钠的关系。也用于中和样品增菌培养。

背景技术

本发明的目的在于提供一种十二烷基硫酸钠中和增菌肉汤，该培养基营养丰富，适宜肠道菌的测定；用于样品增菌培养，可用于中和样品增菌培养。十二烷基硫酸钠中和增菌肉汤营养丰富、配制简单、选择性强，与传统培养基比较，检出率高，污染小，临床应用效果满意.大大提高检测阳性率，方法简单、时间短、准确性高。

发明内容

本发明的要点在于选择合适的组分，并进行合理混配，经加温、溶解、混合、冷却、分装、高温灭菌等工艺而成一种十二烷基硫酸钠中和增菌肉汤。

本发明选择的培养基配方如下(克、ml/每升蒸馏水)胰蛋白胨20.0-22.0；乳糖5.0-5.5；磷酸氢二钾2.70-2.75；磷酸二氢钾2.70-2.75；水杨苷0.5-0.6；土温-80 1.0-1.2；TritonX-1001.0-1.2；甘氨酸0.5-0.6；氯化钠5.0-5.5；十二烷基硫酸钠0.1-0.2；蒸馏水至1000mL。

胰蛋白胨对接种少量大肠菌群可刺激其生长和产气。需氧芽孢杆菌则全被抑制，可直接用于吲哚试验，做吲哚试验时，应预先加入少量乙醚并震摇后，再加上一层吲哚试剂，不在震摇，视二液接触面有无紫红色出现，若不加乙醚，则易形成持久的乳化而干扰吲哚试验，这是因存在十二烷基硫酸钠的关系。

十二烷基硫酸钠中和增菌肉汤，原材料易得，制作方便，基础成分加入营养丰富的牛肉浸粉、酵母浸膏粉，酵母浸膏粉主要为微生物生长繁殖提供可溶性含氮物质、核酸降解物、维生素及无机盐类等，以补充蛋白胨营养成分的不足部分。

水杨苷、土温-80、Triton X-100、甘氨酸中和样品中磺胺类药物及消毒剂的抑菌作用；十二烷基硫酸钠破坏样品中存在的四环素、金霉素、新霉素、多黏菌素及链霉素的抑菌作用。

质控此培养基呈淡琥珀色，透明，可有絮状沉淀。质控菌株接种后，两种温度培养18~24h，结果如下产气大肠杆菌(ATCC13048)生长良好、大肠埃希菌(ATCC25922)生长良好、鼠伤寒沙门菌(ATCC14028)生长良好、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)生长良好。

本发明产品的制备方法是：

1)、各成分混合于水中，加热溶解，调pH6.6~7.0，

2)、分装于放有发酵倒管的试管，每管10mL，121℃15min高压灭菌备用。