[发明专利]一种特异抑制肿瘤细胞和肿瘤新生血管的多肽ERC(N5)无效
| 申请号： | 200810100199.X | 申请日： | 2008-05-28 |
| 公开（公告）号： | CN101280004A | 公开（公告）日： | 2008-10-08 |
| 发明（设计）人： | 杨涛;杨利军;张利;索利敏;赵志强;李方;牛勃;张栋;闫俊;张建林 | 申请（专利权）人： | 山西医科大学 |
| 主分类号： | C07K7/08 | 分类号： | C07K7/08;C12N15/11;C12N15/70;A61K38/10;A61P35/00;A61P35/04 |
| 代理公司： | 北京华科联合专利事务所 | 代理人： | 杨厚;王为 |
| 地址： | 030001*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 特异 抑制 肿瘤 细胞 新生 血管 多肽 erc sup | ||
【权利要求书】：
1、一种小分子多肽ERC(N5)，其蛋白质一级结构为ARGDNMPRNPHKGPAT，基因序列为gct cgt ggt gac aac atg ccg cgt aac ccg cac aaa ggt ccg gct act。
2、制备权利要求1所述多肽ERC(N5)的方法，其主要步骤包括：
a、目的基因的获取：根据ERC(N5)的氨基酸序列，利用大肠杆菌偏爱密码子，设计ERC(N5)的全基因序列，在基因上、下游引入恰当的酶切位点合成得到；
b、融合蛋白表达体系的构建：将目的基因片段克隆、转化大肠杆菌，经质粒提取、PCR、酶切鉴定，选取正确重组质粒进行DNA测序，将序列准确无误的重组子经限制性内切酶消化，回收目的片段后，克隆于融合表达载体；
c、融合蛋白的表达：含重组表达载体的宿主菌，在适当条件下表达融合蛋白，进行SDS-PAGE电泳检测；
d、融合蛋白的精细与纯化：采用高压液相HPLC方法，对ERC(N5)进行精细纯化，得到ERC(N5)纯品；
e、融合蛋白的结构确证：对精细纯化后的蛋白ERC(N5)进行LC-ESI-MS/MS质谱分析，确证其一级结构。
3、权利要求1所述多肽ERC(N5)在制备治疗恶性肿瘤增值及转移药物中的应用。
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