[发明专利]防治植物真菌病害的多粘类芽孢杆菌及其生产方法

说明书

技术领域

本发明属于生物农药技术领域。

技术背景

根据味精生产过程中废水所含污染物情况可分成三类：一是高浓度高酸度有机废水即离交尾液；二是其它中高浓度有机废水；三是不需处理直接外排的冷却降温水。离交尾液是通过离子交换法提取谷氨酸后剩余的“废液”，它既含有丰富的有机质，还含有N、P、K等少量无机盐及其它微量元素，这些物质都可为微生物生长提供营养。其它中高浓度有机废水包括：淀粉废水、制糖废水、发酵洗灌废水、精制废水等。淀粉废水和制糖废水除了含有一定的有机污染物质外，还有一些悬浮物质；发酵洗灌废水与离交尾液所含成分基本相同，只是含量较低；精制废水有时呈酸性，有时呈碱性，有机物污染物质含量较高，这些有机废水也是微生物资源开发比较理想的营养来源之一。但是，这些废水如果得不到合理利用，不仅会对环境造成严重污染，而且使资源白白浪费掉。

文献报导味精废水造成较大环境污染，如中国环境生态网上指出2005年全国味精生产厂家230余家，年排放废水17万吨，绝大多数未经治理直接排放(http://www.eedu.org.cn/Article/es/envir/ptheory/water/200511/6456.html)。中国专利(公开号：CN 1916155A)中公开了一种利用味精废水制备发酵培养基及生产生物农药灰色链霉菌的方法，目前，众多味精废水处理技术大致分为两步，一是提取废水中的谷氨酸菌体单细胞蛋白，通过此步分离菌体，约可除去30％左右的COD，常用物化方法进行处理(如絮凝、离心等方法)；二是提取菌体后废液的处理，使其达到排放标准或处理后用于工厂回用，这也是众多味精废水处理技术所面临的关键问题，常采用生物处理方法(如厌氧发酵、生物膜法，SBR法等)。

多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)在自然界中分布广泛，是一种重要的生防菌，对多种植物真菌、细菌病害均有较好的防治作用。王智文等报道了一株多粘类芽孢杆菌Cp-S316菌株对动植物真菌、细菌病原物具有广谱抗性，利用大孔吸附树脂对多粘类孢杆菌Cp-S316产生的抗真菌活性物质的吸附、解吸性能，筛选出其最佳解吸剂，该活性物质对热、紫外线稳定，对胰蛋白酶、蛋白酶K有一定的耐受性，对氯仿部分敏感，对酸稳定，对碱敏感(王智文，袁士涛，何亮等，多粘类芽孢杆菌Cp-S316抗真菌活性物质的提取及其部分性质研究，农业环境科学学报，2007，26(4)：1464-1468)。中国专利(授权公告号：CN 1169942C)中报导培养的Paenibacillus polymyxa HY96-2及其发酵上清液可以用来防止植物细菌性青枯病，而且还可用来防治植物苗期立枯病，猝倒病，以及黄瓜枯萎病，番茄枯萎病，茄子枯萎病，大豆根腐病，并且对植物具有十分明显的促进生长作用。中国专利(授权公告号：CN 1186441C)中公开了Paenibacillus polymyxa可以作为微生物肥料菌剂中的一种成分分解秸秆，有效解决农业生产中一方面农业垃圾过多，污染水体和环境，处理困难，另一方面化肥，农药使用过多，土壤恶化的矛盾。中国专利(授权公告号：CN 1325635C)中公开了Paenibacillus polymyxa Jaas cd可以在较低的浓度下进入植物体内，并能在植物体内定植，繁殖和传导；对植物同时具有促进生长，提高产量，防病抗病的作用，特别是对土传维管束病害具有良好的防治效果。

多粘类芽孢杆菌生防剂的生产方法有多种，如；中国专利(公开号：CN 1844360A)中公开了一种多粘类芽孢杆菌的生产方法，其培养基为豆渣。中国专利(授权公告号：CN1186441C)中使用庖肉培养基作为多粘类芽孢杆菌发酵培养基。以味精废水为培养基生产多粘类芽孢杆菌生防剂的方法未见文献报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种能够在植物叶际与根际定植，并且对多种病原菌具有拮抗作用的生防菌——多粘类芽孢杆菌EBL-06菌株，同时提供一种利用味精废水生产该生防菌剂的方法。

本发明所提供的生防菌株是由我们实验室从小麦的叶面上分离筛选出来的。将其编号为EBL-06，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为二零零八年二月二十六日，分类命名为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)。保藏编号为：CGMCC No.2377。该菌株具有下列性质：

1菌落形态特征