[发明专利]一种用HPLC法分离分析盐酸多培沙明的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种高效液相分析分离方法，特别是一种用高效液相色谱法分离 分析盐酸多培沙明的方法。

背景技术

盐酸多培沙明有很强的β₂肾上腺素能受体兴奋作用，主要用于急性心衰和 心脏手术后心输出量低的病人。其结构式为：

分子式为C₂₂H₃₄Cl₂N₂O₂，分子量429.4

盐酸多培沙明与其中间体相比有较强的极性，在同一色谱条件下实现它们的 快速分离有较大的困难，因此，实现盐酸多培沙明与其中间体快速、简单的分离 在盐酸多培沙明的的合成和制剂过程的质量控制方面具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种简单、快速分离分析盐酸多培沙明有关物质的高 效液相色谱方法，从而实现对盐酸多培沙明的质量控制。

申请人发现，用HILIC亲合柱，以含有有机碱的缓冲盐-有机改性剂为流 动相，可以实现盐酸多培沙明与其中间体的简单、快速分离，从而可以准确控制 盐酸多培沙明及其制剂的质量。

本发明所说的用高效液相色谱法分离分析盐酸多培沙明的方法，选用HILIC 亲合色谱柱，以乙酸钠缓冲液-乙腈为流动相，其中含有少量的有机碱。

本发明采用的色谱柱为HILIC亲合色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)。

本发明采用的有机改性剂选自乙腈、甲醇，最优选的有机改性剂为乙腈。

本发明的方法的流动相中，乙酸钠缓冲液-有机改性剂混合溶液的体积比为 40∶60～62∶38。

本发明方法的流动相中包含的有机碱选自乙二胺、二乙胺、三乙胺，最优选 的为三乙胺，有机碱的浓度为(V／V)0.1％～0.5％。

本发明所述的分离分析方法，可按照以下方法实现：

(1)称取盐酸多培沙明样品适量，用流动相溶解样品，配制成每1mL含酒 石酸福莫特罗0.2mg～2mg的样品溶液。

(2)设置流动相流速为0.6～1.2mL／min，检测波长为280±3nm。

(3)取步骤(1)的样品溶液2-50μL注入液相色谱仪，完成盐酸多培沙明的分 离与分析。

其中：

高效液相色谱仪：岛津：LC-10ATvp，SPD-M10Avp，SCL-10Avp，DGU-12A

色谱柱：HILIC亲合色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)

流动相：乙酸钠缓冲液-乙腈-三乙胺＝50∶50∶0.2

流速：1.0mL／min

检测波长：280nm

柱温：室温

进样体积：20μL

本发明采用HILIC亲合色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)，能够有效的分离 分析盐酸多培沙明有关物质；选择流动相溶解样品，可以消除溶剂对检测的干扰； 选择进样体积20μL，柱温为室温，加入有机碱提高了色谱峰的对称性。本发明 解决了简单、快速分离与分析盐酸多培沙明有关物质的问题，从而确保了盐酸多 培沙明原料药和制剂的质量可控。

附图说明

图1  实施例1，乙酸钠缓冲液-乙腈(50∶50)并加入三乙胺的盐酸多培 沙明与中间体混合样品高效液相色谱图

图2  实施例2，乙酸钠缓冲液-乙腈(50∶50)并加入三乙胺的盐酸多培 沙明高效液相色谱图

图3  实施例3，乙酸钠缓冲液-乙腈(50∶50)盐酸多培沙明高效液相色 谱图

具体实施方式：以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围。

实施例1

仪器与条件

高效液相色谱仪：日本岛津：LC-10Avp，SPD-10Avp；

色谱柱：HILIC亲合色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)

流动相：乙酸钠缓冲液-乙腈-三乙胺(40∶60∶0.2)

流速：1.0mL／min；

检测波长：280nm；

柱温：室温；

进样体积：20μL。

实验步骤