[发明专利]检测POU3F4基因499C>T突变的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及用于检测POU3F4基因499C＞T突变基因的试剂盒。

本发明还涉及新的POU3F4突变基因及其诊断和/或治疗人类遗传性耳聋的应用。

背景技术

遗传性聋分为非综合征型耳聋(nonsyndromic hearing impairment，NSHI)和综合征型耳聋(syndromic hearing impairment，SHI)。全部NSHI和绝大部分SHI是孟德尔遗传单基因病，极少部分SHI是染色体病。耳聋是导致交流障碍最常见的疾病。估计全世界约有7亿人口听力损失至少达55dB，其中，学语前聋是常见的发病形式，也是社会影响较重的一类，发病率为1/1000，约半数是遗传因素所致，此人群已超过27/万，其中70％是NSHI，30％是SHI。遗传性聋在16世纪就有文献记载，但由于内耳部位深，体积小，研究手段受到限制，因此认识和理解控制听觉系统的基因研究进展很慢。近10多年来，随着现代科学技术的发展及分子生物学、遗传学的飞速发展，人们对遗传性聋的认识不断加深，并取得了显著进步。

X-连锁遗传NSHI以DFN表示，已报道8型(DFN1～DFN8)，DFN2、DFN4、DFN6 3型已基因定位，DFN1和DFN3已基因克隆。DFN1在儿童早期开始进行性听力下降，以后可合并进行性肌张力障碍、痉挛、吞咽困难、精神障碍、偏执狂、皮质盲，该型耳聋实质上属于SHI，因疾病早期仅出现听力受损，遗传性聋分型时被纳入了NSHI。DFN3是X-连锁遗传NSHI最常见的类型，临床表现为伴有镫骨固定的混合性聋，神经性聋呈进行性下降，内耳道和前庭异常扩大，小耳蜗，半规管半径变小，高分辨CT扫描可发现内耳道异常扩大、蜗轴异常、蛛网膜下腔与外淋巴腔直接相通，镫骨底板切除或卵圆窗开窗后发生外淋巴液“井喷”，有导致全聋之虞，为手术禁忌。DFN1和DFN6在儿童期开始出现进行性高频感音神经性聋，成年后可达累及全频率的中～深度聋。X-连锁遗传NSHI女性携带者多表现为不完全显性，成年后可出现轻-中度听力受损，可进行性加重。

根据Shine和Watson在1967年的报道，在一个夏威夷-华裔家系的两代人中，9个个体患有传导性耳聋、前庭系统障碍，术中发现镫骨底板固定。当镫骨底板活动后，大量的外淋巴和脑脊液涌出，提示耳蜗导水管异常开放。Nance et al.(1970，1971)在欧洲观察到一个相似的家系，在这个家系中，听力下降为混合型。Phelps等(1991)研究了7个X连锁形式的耳聋家系，多数患者内听道的末端膨隆和内听道末端与耳蜗基底转之间的骨质缺损。Phelpset al.(1991)认为这是由于内听道蛛网膜下腔间隙和耳蜗外淋巴之间的交通导致了外淋巴“水肿”，如果镫骨受扰，则会出现镫井喷。一些女性携带者表现较为轻微。de Kok等(1995)总结了DFN3的特征，指出耳聋为镫骨固定引起的传导性耳聋和进行性的感音神经性听力下降引起的混合型，有时极重的感音神经性聋会掩蔽传导性成分。CT扫描显示内听道异常扩张和内听道与内耳之间的异常沟通，因此形成了在打开镫骨底板时出现镫井喷的原因。

Bitner-Glindzicz在POU3F4基因发现了特殊的突变，他认为DFN3应以极重的感音神经性聋伴或不伴传导成分，伴随独特的耳发育障碍为特征，极重度的感音神经性聋是这种疾病的必要条件。

Douville等(1994)报道小鼠的基因Brain-4(Pou3f4)编码一种转录因子定位在Plp和DXMit6标记之间，这一区域在小鼠和人类的染色体高度保守，因此提示人类POU3F4基因位于Xq13-q22之间。POU3F4在小鼠中的同源基因——RHS2，在胚胎发育过程中，受孕后15.5～17.5天在脑、神经管和听泡表达，因此胚胎早期它的定位和空间/时间表达模式上都提示是X连锁混合型听力下降伴外淋巴井喷的候选基因。在5位无关的DFN3患者中，de Kok et al发现了2个错义突变和2个无义突变，这些突变导致了蛋白截短或非保守氨基酸替代。而在50位对照者中没有发现POU3F4基因突变。说明POU3F4突变是DFN3的分子基础。

由POU3F4基因突变导致的X-连锁遗传的耳聋曾有多个家系的报道，包括一个中国家系，家系患者具有特征性的临床表现，该基因是一个值得关注的耳聋相关基因。目前尚无关于在耳聋患者中发现POU3F4基因499C＞T突变的报道。

发明内容

本发明的一个目的在于提供用于检测POU3F4突变(499C＞T)基因的试剂盒。