[发明专利]植物ABA信号传导调控蛋白及其编码基因与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物ABA信号传导调控蛋白及其编码基因与应用，特别是涉及一个来源于拟南芥的ABA信号传导调控蛋白及其编码基因与应用。

背景技术

脱落酸(abscisic acid，ABA)是一种非常重要的天然植物生长激素，是最早得到确认的五大类植物激素之一。脱落酸参与了许多植物生长和发育过程，如种子萌发、幼苗生长、叶片气孔开闭等，此外还是一种重要的抗逆诱导因子，介导了植物对逆境如干旱、盐碱、低温等的抵抗作用，因此脱落酸信号转导的研究对植物生长发育调控的理解、作物品质的提高具有十分重要的意义。

目前，ABA信号传导途径中，已经有两个不同的RING FINGER类泛素连接酶的功能研究报道，它们是AIP2和KEG，是两个负调控因子，分别降解ABA信号途径两个基本点重要的组分ABI3和ABI5。

目前，已有多个拟南芥ABA突变体得到鉴定，同时关于ABA的合成和信号传导基因在许多物种中已有分离，它们的分子机理及作用机制已经得到广泛深入的研究。

发明内容

本发明的目的是提供一种植物ABA信号传导调控蛋白及其编码基因。

本发明的目的是提供一种植物ABA信号传导调控蛋白及其编码基因。

本发明所提供的植物ABA信号传导调控蛋白，名称为RHA2a，来源于拟南芥(Arabidopsis thaliana)，是如下(a)或(b)的蛋白质：

(a)由序列表中序列3的氨基酸残基序列组成的蛋白质；

(b)将序列表中序列3的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有植物ABA信号传导调控功能的由(a)衍生的蛋白质。

其中，序列表中的序列3由155个氨基酸残基组成。

上述植物ABA信号传导调控蛋白的编码基因(RHA2a)也属于本发明的保护范围。

上述植物ABA信号传导调控蛋白的cDNA基因，可具有下述核苷酸序列之一：

1)序列表中序列2的DNA序列；

2)编码序列表中序列3所示蛋白质序列的多核苷酸；

3)在高严谨条件下可与序列表中序列2限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。

其中，序列表中序列2是由468个脱氧核苷酸组成，自序列表中序列2的5′端第1-468位核苷酸序列为编码序列(ORF)，编码具有序列表中序列3的氨基酸残基序列的蛋白质。

上述植物ABA信号传导调控蛋白的基因组基因，可具有下述核苷酸序列之一：

1)序列表中序列1的DNA序列；

2)编码序列表中序列3所示蛋白质序列的多核苷酸；

3)在高严谨条件下可与序列表中序列2限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。

其中，序列表中序列1是由3110个脱氧核苷酸组成，自序列表中序列1的5′端第1766-2233位核苷酸序列为编码序列(ORF)，编码具有序列表中序列3的氨基酸残基序列的蛋白质。

上述高严谨条件可为在0.1×SSPE(或0.1×SSC)，0.1％SDS的溶液中，在65℃下杂交并洗膜。

含有上述植物ABA信号传导调控蛋白的编码基因的表达载体、转基因细胞系及宿主菌均属于本发明的保护范围。

利用植物表达载体，将本发明的调控ABA信号传导的基因(RHA2a)导入植物细胞或组织，可得到对种子萌发和早期生长阶段对ABA敏感性升高的植物。

使用RHA2a构建植物表达载体时，在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强型启动子或诱导型启动子。为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用植物表达载体进行加工，如加入可在植物中表达的选择性标记基因(GUS基因、萤光素酶基因等)或具有抗性的抗生素标记物(庆大霉素标记物、卡那霉素标记物等)。从转基因植物的安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以逆境筛选转化植株。

携带有本发明RHA2a的植物表达载体可通过使用Ti质粒、Ri质粒、植物病毒载体、直接DNA转化、显微注射、电导、农杆菌介导等常规生物学方法转化植物细胞或组织，并将转化的植物组织培育成植株。被转化的植物宿主既可以是水稻、玉米、小麦等单子叶植物，也可以是番茄、拟南芥、烟草、棉花等双子叶植物。

本发明的植物ABA信号传导调控蛋白是具有泛素连接酶活性的蛋白，其编码基因是RING FINGER家族中结构相对简单的一个新基因。功能研究表明，本发明的植物ABA信号传导调控蛋白是ABA信号传导途径的一个正调控因子。本发明植物ABA信号传导调控蛋白可调节植物对ABA敏感性，对植物中基因的分离和功能研究提供了重要手段。

附图说明