[发明专利]脱γ羧基凝血酶原微孔板化学发光免疫分析测定试剂盒及其制备方法

权利要求书

1、一种脱γ羧基凝血酶原(DCP)化学发光免疫分析测定试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

1)DCP校准品；

2)DCP多克隆抗体包被的微孔板；

3)辣根过氧化物酶标记的DCP单克隆抗体；

4)发光底物液；

5)浓缩洗涤液

2、如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述微孔板所用的包被原DCP多克隆抗体，首先与DCP干扰物混合，具体的，干扰物包括凝血酶、凝血素和血纤维素及其类似物。然后进行离心分离，从而将抗体纯化。

3、一种制备权利要求1所述试剂盒的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)以DCP纯品配制校准品；

2)制备纯化的DCP多克隆抗体，包被微孔板；

3)制备辣根过氧化物酶标记的抗抗DCP单克隆抗体；

4)配制辣根过氧化物酶所作用的化学发光底物液；

5)配制浓缩洗涤液；

6)分装上述各组分，并组装为成品。

4.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述包被固相载体的步骤3)，包括以下步骤：纯化后的DCP多克隆抗体配制成包被缓冲液；DCP多克隆抗体包被缓冲液过夜包被微孔板；生理盐水洗涤后，以封闭液封闭；再干燥后封板，于4℃保存。

5.如权利要求4所述，其特征在于，所述封闭液为复合封闭液：1000mL磷酸缓冲液，含0.2g NaH₂PO₄·2H₂O、2.9g NaH₂PO₄·12H₂O，加入10g BSA、1g水解明胶和1mL生物防腐剂，所述封闭液的pH值为7.0～7.6，然后将所得封闭液负载于上述洗涤后的固相载体上。

6、如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述化学发光底物液包含A液和B液，其中，

所述化学发光底物A液，包括10mM鲁米诺、0.3mM 4-羟基联苯、0.05mM 4-碘苯硼酸、0.2M pH8.7硼酸-硼砂缓冲液，其pH值为8.0～10.0；

所述化学发光底物B液，包括3.5mM过氧化脲、0.1％ Tween20、0.2M pH7.2磷酸盐缓冲液，其pH值为7.0～7.6。

7.如权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述浓缩洗涤液使用前需用去离子水30倍稀释。