[发明专利]肌醇磷脂4位激酶二型α亚型PI4KIIα的应用

说明书

背景技术

肌醇磷脂(PI)信号通路在跨膜信号转导和多种生长因子和激素调节 细胞生长的信号通路中起核心作用。肌醇磷脂4位激酶PI4K是PI信号通路 中第一个起重要作用的激酶，在肌醇磷脂循环过程中PI4-K首先催化肌醇 磷脂(PI)环上D4位磷酸化，产生4-磷酸磷脂酰肌醇(4-phosphatidyl-inositide， PIP)，然后由PIP5-K激酶进一步催化合成(4，5-phosphatidyl-inosidide diphosphate，PIP2)；PIP2在磷脂酶C(Phospholipase C，PLC)的作用下水 解为三磷酸肌醇(1，4，5-trisphosphoinositol，IP3)和甘油二酯(Diacylglycerol， DAG)，作为第二信使，引发胞内钙释放和激活蛋白激酶C(Protein kinase C， PKC)，启动细胞内的双信使系统。另外，PIP2也是PI3-K的底物，因而PI4K 影响PI3-K信号通路。近年研究发现PIP，PIP2本身也具有重要生物学功能。 因此，PI4K是PI信号通路中的关键分子，关于PI4K的功能研究引起了人们 越来越多的关注。

胞内PI4K相关的信号通路：

PI4K有二型和三型两种类型，其中二型包括α和β两种亚型(PI4KII α和PI4KIIβ)。PI4KIIα的基因编码和蛋白序列分别见GenBank accession number：NM_018425(SEQ ID NO：10)和GenBank accession number： NP_060895(SEQ ID NO：9)，其主要功能与膜转运密切相关。此外，PI4KII α在神经递质释放、宿主细胞激活、调控内皮生长因子EGF方面有重要作 用。但其生物学功能还远未得到阐明。其在肿瘤中的作用和机制在国内外 均未见报道。

有文献报道癌症病人的PI激酶活力增高，细胞内PKC的量明显增高， 说明肌醇磷脂信号通路可能与肿瘤相关。关于PI4KIIα也有一些间接证据 表明其可能在肿瘤中起作用。如：PI4KIIα与调控细胞迁移的蛋白 valosincontaining protein(VCP)共定位，而VCP上调是癌症诊断的一个标志 物。PI4KIIα能调控与肿瘤生长密切相关的表皮生长因子(epidermal growth factor receptor，EGFR)的表达。大多数肌醇磷脂激酶在癌细胞中酶 活上调，其中包括PI4K。但至今没有关于PI4K与肿瘤生长有关的直接证据 及分子机制研究。

寻找特异信号通路的抗肿瘤靶点和抗血管新生是目前抗肿瘤策略的 焦点。国际上以PI4K下游的信号分子PKC、PLC以及PI3-K为靶分子寻找 新药的工作已有报导。我们研究发现PI4KIIα在缺氧诱导因子HIF-1α合成 中起关键作用。由于受HIF-1α转录调控的下游基因——血管内皮生长因 子VEGF通过调控内皮细胞的增殖、存活、转移控制血管生成，所以HIF-1 α与肿瘤生长和血管新生直接相关，调控HIF-1α是重要的抗肿瘤的有效 策略。PI4KIIα对HIF-1α的关键调控作用使其可能在肿瘤生长和血管新生 过程中发挥重要作用。

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