[发明专利]一种苏云金芽孢杆菌伴孢晶体反浮选分离纯化生产工艺

权利要求书

1、一种苏云金芽孢杆菌伴孢晶体反浮选分离纯化生产工艺，其特征在于：按重量百分比称取牛肉膏0.2～0.4％，蛋白胨0.6～1.5％，氯化钠0.3～0.6％，琼脂1.3～2.5％，水95～98％，用NaOH调pH＝7.4～7.6，100～130℃灭菌20～40分钟，在洁净工作台中将灭菌后的液体倒入已灭过菌的大培养皿中，自然冷却至室温，液体凝固形成琼脂固体培养基；用接种环沾取Bt菌种，在琼脂固体培养基表面接种，之后在生化培养箱中26～36℃培养36～48小时；用无菌纯净水将菌苔冲洗到容器中，得到无菌水菌苔悬浊液；用超声波细胞粉碎机处理菌苔悬浊液10～30分钟后，将此菌苔悬浊液注入微泡浮选柱中浮选；在此反浮选过程中，芽孢和营养体碎片进入泡沫层而脱离体系，伴孢晶体则留在液浆中，之后以7000～9000转/分钟的转速离心液浆10～20min，弃去上清液，得到伴孢晶体半成品；洗涤伴孢晶体半成品，以7000～9000转/分钟的转速离心，得到含水的伴孢晶体，在-20～-80℃，0.1～1.0Pa真空度条件下干燥3～4小时，得到伴孢晶体纯品。

2、如权利要求1所述的生产工艺，其特征在于，在琼脂固体培养基表面上按“之”字形接种。

3、如权利要求1所述的生产工艺，其特征在于，所述的浮选是将菌苔悬浊液逐步注入30～100L微泡浮选柱中，浮选的进气量为2～8L/min，浮选10～30分钟。

4、如权利要求1所述的生产工艺，其特征在于，所述的洗涤伴孢晶体半成品是用0.5～1.5M NaCl生理盐水洗涤伴孢晶体半成品3～5次，每次10～15L，再用无菌纯净水洗涤伴孢晶体半成品3～5次。

5、如权利要求1所述的生产工艺，其特征在于，得到的伴孢晶体纯品于-20～-80℃环境中保存。