[发明专利]一种胰岛细胞抗体化学发光免疫分析测定试剂盒及其制备方法

权利要求书

1、一种胰岛细胞抗体化学发光免疫分析测定试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的组分主要有：胰岛细胞抗体阴性和阳性对照品；样品稀释液；胰岛细胞抗原包被的固相载体；羊抗人IgG抗体酶标记物；化学发光底物；以及浓缩洗涤液。

2、如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述固相载体为微孔板、塑料珠、塑料管或磁性颗粒。

3、如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述酶为碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶。

4、如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述样品稀释液为灭活的小牛血清。

5、一种制备权利要求1所述试剂盒的方法，其特征在于包括以下步骤：

1)配制胰岛细胞抗体阴性和阳性对照品；2)配制样品稀释液；3)以胰岛细胞抗原包被固相载体；4)以酶标记羊抗人IgG抗体；5)配制化学发光底物；6)配制浓缩洗涤液；7)分装上述阴性和阳性对照品、样品稀释液、酶标记物、化学发光底物和浓缩洗涤液；8)组装为成品。

6、如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述胰岛细胞抗原包被微孔板、塑料珠和塑料管的步骤3)采用以下方法：用0.050M pH值为9.6的碳酸盐缓冲液配制成所需浓度的包被液，并将其负载于固相载体上，然后进行洗涤，BSA封闭，除湿干燥并用铝箔袋封装。

7、如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述胰岛细胞抗原联结磁性颗粒的步骤3)采用以下方法：将磁颗粒用戊二醛进行活化，用pH值为7.4的0.01mol/L磷酸盐缓冲液清洗并用该溶液进行悬浮；在悬浮液中加入适量的胰岛细胞抗原，4℃下搅拌过夜后，然后用含有0.2％～1.0％牛血清白蛋白、0.5％～1.0％酪蛋白、0.02mol/L的磷酸缓冲液封闭；最后用pH值为7.4、含吐温-20和叠氮化钠防腐剂的磷酸盐洗涤缓冲液清洗，并用该溶液配制成所需浓度的工作液。

8、如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述化学发光底物的发光剂为1，2-二氧乙烷类衍生物、鲁米诺或异鲁米诺。

9、如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述1，2-二氧乙烷类衍生物为(金刚烷)-1，2-二氧乙烷、3-(2′-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3″-磷酰氧基)苯基-1，2-二氧乙烷、CSPD或CDP-Star。

10、如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述化学发光底物包括A液和B液，其中，

基于1000mL所述化学发光底物A液，包括1.7716g鲁米诺、0.051g 4-羟基联苯、0.012g 4-碘苯硼酸、11.4g硼酸、4.9g硼砂，其pH值为8.0～10.0；

基于1000mL所述化学发光底物B液，包括0.329g过氧化脲、1ml Tween20、51.58g Na2HPO4·12H2O、8.74g NaH2PO4·2H2O，其pH值为7.0～7.6。