[发明专利]一种新的探针药物组合、制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及医药领域，尤其涉及一种新的“cocktail”探针药物组合物，通过其药代动力 学参数的变化来评价肝缺血预适应和肝缺血再灌注损伤对大鼠CYP亚型CYP1A2、 CYP2C9、CYP2E1、CYP2D6和CYP3A4体内药物代谢活性的影响。

背景技术

许多外源性物质(xenobiotics)在体内需经过生物转化过程，肝脏是人体进行生物转化 I相反应的主要场所。参与生物转化的酶类是由一个庞大的基因家族编码调控的依赖细胞色 素P450的混合功能氧化酶系统，其中主要成分是细胞色素P450(CYP)酶系。CYP在人 类分为17个基因家族，42个亚家族，64个酶。其中与肝脏药物代谢密切相关的功能酶有 CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2E1、CYP2D6和CYP3A4。

在人体中许多因素如遗传因素、年龄、性别、疾病和环境等都可以影响CYP酶的活性， 因此对CYP的研究在临床药理学中具有重要的意义，它可以指导临床合理用药，提高药物 治疗水平：1.由药物所致药物代谢酶的活性增强/减弱或数量增多/减少，引起联合用药中药 物相互作用问题，为临床制定合理的给药方案提出要求。2.在分子水平研究药物在不同种族 或个体体内的代谢规律，为实现临床个体化用药提供指导。3.肝脏疾病状态下，以CYP为 主的肝脏药物代谢酶活性和/或含量发生改变，导致药物代谢功能的变化，往往与许多临床 用药方案的重新调整息息相关。而且，目前欧美各国已经把对CYP的活性测定用于新药筛 选及代谢研究，并把它列为新药申报必须进行的一项实验。我国颁布的《化学药物非临床 药代动力学研究技术指导原则》中也已积极倡导对CYP活性进行研究。

目前，用于研究CYP活性的方法主要分为体内和体外研究两大类。体外研究常用的方 法有肝微粒体孵化，基因重组P450酶系，肝细胞培养和肝脏组织切片法。体外研究一般可 以作为确定体内试验研究方向的预试验而应用，因为体外与体内真实的生理环境还是有很 大不同，如酸碱度、辅助因子等，另外，体内还有II相代谢酶的存在，因此药物的代谢可 能会有所差异，这也限制了体外研究方法的广泛应用。体内研究方法主要有基因分型法和 探针药物法。基因分型法是直接测定特定的DNA的变异来评价药物代谢酶的活性。但是个 体代谢酶基因变异发生频率较低，有很多还未被认定而且是非特征性，再加上基因型检测 费用高，并不是所有的基因型变异都导致表现型改变等都限制了该方法的实际应用。因此 现在最常使用的是直接测定体内酶的活性(表现型)的方法即探针药物法，它不仅考虑了 基因而且还考虑了环境等因素对代谢酶活性的影响。目前探针药物法又主要分为两种。其 中一种是单独使用一种探针药物，即选用只被一种特定的酶亚型催化或者即使被几种亚型 酶催化但已确知其代谢途径及其产物的物质，通过测定其体内的代谢速率，如在尿中、血 中或者唾液中的原型物与代谢产物浓度的比值来作为评价该酶的活性的指标；另外一种是 “cocktail”法，即“鸡尾酒”法，因为外源物质的代谢需要多种酶共同参与，而且酶多具有 底物特异性，单一的探针药物只能反映一个或部分CYP酶亚型的活性，没有一种药物可以 同时评价几种酶的活性。实践中又常需要有选择性地了解多个CYP亚型酶的活性，于是发 展出了同时给予多个探针药物的方法，即“cocktail”探针药物法，该方法可以明显减少分析 周期，提高分析效率，更重要的是这种方法可以减少个体内的差异对实验结果的影响。但 同时“cocktail”探针药物法也有很多不足之处，如构成该cocktail的几种药物在代谢方面可 能存在着相互作用，而且它对分析方法的敏感性和特异性要求较高，这样就会提高分析成 本。但有研究指出在满足分析方法的各种要求前提下，潜在的相互作用可以通过控制药物 的剂量来降低，而且随着现在许多高特异性和高灵敏度方法的使用，如液相色谱质谱串联 法，相信对于“cocktail”建立一个有效的分析方法将不再是限制其应用的主要因素。