[发明专利]一种鼠李糖乳杆菌Pr2肽及其编码基因、分离方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及免疫医学领域，具体地，本发明涉及一种鼠李糖乳杆菌Pr2肽及其编码基因、分离方法和应用。

背景技术

调节性T细胞(Tregs)在调控T细胞反应中起重要作用。Tregs能够在胸腺内外产生。这种细胞表达转录因子Foxp3、CD4、CD25，糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体和细胞毒性T淋巴细胞抗原-4。有活性的Tregs的抑制功能至少部分依赖于它们表达的TGF-β、IL-10、细胞毒性T淋巴细胞抗原-4或FasL。这些分子能够通过诱导凋亡的途径使靶细胞死亡。在遗传性过敏症中，认为过敏原特异性Tregs功能的失常与过敏原特异性Th2反应和过敏性炎症相关。大量研究报道也显示Tregs在防止自身免疫性疾病和调节机体过激的免疫反应方面发挥重要作用。然而，诱导Tregs产生的机制，特别是胸腺外抗原特异性Tregs细胞的产生机制仍未明了。

已经有报道尝试了一些用于产生治疗目的Tregs的方法：在高浓度的IL-2培养条件下扩增胸腺来源的Tregs被认为是一种简便易行的方法，然而，这种细胞增殖能力差的特性限制了这种方法的运用；雷怕霉素一种抗生素，用于增殖天然的Tregs，然而其结果还存在争议。

DCs在抗原呈递、初始T细胞活化和Th1或Th2细胞分化中具有关键作用，从而在启动抗原特异性免疫反应或耐受^[11]中起重要作用。最近研究进展显示：共培养初始T细胞和耐受性DCs能够显著增加Tregs的增殖，这项研究有望提供一个产生Tregs的方法。然而，耐受性DCs的产生机制和它怎样确切的诱导Tregs产生机制仍未被阐明，一些生长因子包括IL-10、转化生长因子β(TGF-β)、粒细胞克隆刺激因子、血管活性肠肽被认为起重要作用^[14]。这些研究不仅显示在实验条件下产生和应用耐受性或调节性DCs，可作为一种新的免疫抑制性治疗策略应用于免疫调控，而且，还显示DCs在胸腺外抗原特异性Tregs发生发展中起重要作用。

肠道共生微生物菌群通过调节新陈代谢、局部和整体的免疫功能、防止病原微生物繁殖，从而给机体带来明显益处。大量研究资料也表明肠道微生物菌群改变与一些免疫和炎症反应相关，包括炎症性肠病(IBD)、过敏性疾病、关节炎。这些研 究表明除了它们的已知功能外，肠道微生物还具有重要的免疫调节功能。基于以上研究结果，一些共生的益生菌株如乳酸菌、双歧杆菌已经在临床和实验条件下用于抑制免疫功能紊乱性疾病。研究显示益生菌治疗作用要求用活的细菌有机体，这意味着起治疗作用的微生物分子只能由活的益生菌株产生。不幸的是，尽管在这方面已取得一些进展，但益生菌中起免疫调节作用成分的性质仍未了解，对益生菌免疫抑制作用的细胞和分子机制了解甚少。

发明内容

因此，本发明的发明人鉴定了一种鼠李糖乳杆菌培养上清液来源的肽-Pr2，能够使骨髓来源的DCs转化为免疫耐受表型，并使之产生IL-10。这种Pr2刺激产生的DCs具有在体外诱导胸腺外抗原特异性Foxp3⁺Tregs产生的能力。此外，我们还证明了这种Tregs或纯化的Pr2能够在体内抑制肠道抗原特异性过敏反应。

本发明的目的之一是提供一种鼠李糖乳杆菌Pr2肽。

本发明的再一目的是提供编码上述鼠李糖乳杆菌Pr2肽的基因。

本发明的再一目的是提供一种分离上述鼠李糖乳杆菌Pr2肽的方法。

本发明的再一目的是提供上述鼠李糖乳杆菌Pr2肽在制备用于治疗免疫功能紊乱性疾病的药物中应用。

根据本发明的鼠李糖乳杆菌Pr2肽，其具有如SEQ No.1所示的氨基酸序列。

SEQ No.1：

AIFPWLVVDG QGSRLPSANV MNLLTTIQML YVERFPREVG AVTDYDVKYE MFGAKIRGTK

60

ENEAFA 66

本发明还提供了编码上述鼠李糖乳杆菌Pr2肽的基因。该基因可以具有如SEQNo.2所示的核苷酸序列。

SEQ No.2：

gcgatttttccgtggctggtggtggatggccagggcagccgcctgccgagcgcgaacgtg

atgaacctgctgaccaccattcagatgctgtatgtggaacgctttccgcgcgaagtgggc

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