[发明专利]一种治疗人宫颈癌的树突状细胞疫苗

说明书

技术领域

本发明涉及一种治疗人宫颈癌的树突状细胞疫苗。

背景技术

1995年6月，国际癌症研究中心(IRAC)公布的研究结果证实人类乳头瘤病毒 (human papillomavirus，HPV)与宫颈癌有非常密切的因果关系。HPV至少存在100个 型别，可分为低危型(如HPV6、11等)和高危型(如HPV16、18、31、33、45和58 等)。高危型HPVs的持续性感染，其中一部分可导致宿主细胞发生宫颈上皮内瘤样 病变(CIN)、宫颈癌以及其它肿瘤，而HPV16、18是主要高危型别，在HPVs所致的宫 颈癌中占70％左右。高危型HPVs的基因组编码早期蛋白E1、E2、E4-7和晚期衣壳蛋 白L1、L2，但不编码E3和E8蛋白。早期蛋白主要涉及病毒基因组的复制、转录调节 和诱导宿主细胞发生转化，晚期蛋白L1具有自我组装成病毒样颗粒(virus-like particle，VLP)的特性。2006年6月，FDA批准宫颈癌预防性疫苗上市，该疫苗利用L1 蛋白能形成VLP，在人和动物体内产生中和性抗体，这是继HBV之后的癌症预防性疫 苗。从长远来看，将会减少宫颈癌的发生。目前临床上宫颈癌的传统治疗方法疗效 不佳，宫颈癌患者化疗有效率一般小于20％，放疗或手术后约四成复发，且预后极 差(5年生存率仅3.2％-13％，只能姑息治疗)。目前公认治疗后残余的HPV病毒颗 粒或DNA可能是其高复发的主要原因之一。研究证明该疫苗不能治疗宫颈癌及被 HPVs感染的患者，因此研发治疗宫颈癌的药物或疫苗是非常必要的，也是宫颈癌研 究的热点。

宫颈癌的发生是一个渐进的过程，主要是由于癌蛋白E6和E7分别与p53和RB相 互作用后，基因组在E2区断裂，并整合到宿主细胞染色体上，这一过程使抑癌基因 功能受损、DNA修复发生障碍、细胞凋亡减少、最终导致细胞永生化；染色体的突 变、杂合子的缺失、原癌基因和端粒酶的激活在HPV诱导的宫颈癌的致病机制中起 重要作用。HPV感染的CIN和宫颈癌患者体内普遍存在免疫缺陷、病人外周血活化T 淋巴细胞及T淋巴细胞总数下降、CD4+T淋巴细胞数量明显减少、MHC表达下降、NK 细胞活性下降和癌细胞转移播散的现象。Langerhan细胞数目减少使它递呈病毒抗原 -HLA给CD4+的功能受损。调节性T细胞的存在，有证据表明HPV16持续性感染的患者 体内循环的CD4+CD25hiCTLA4+FoxP3+调节性T细胞增加，宫颈癌患者宫颈病变处有 CD4+CD25hiCTLA4+FoxP3+调节性T细胞的浸润，说明宫颈癌患者存在对HPVs感染的 免疫耐受。因此，宫颈癌治疗性疫苗的关键是如何增强宿主对HPVs感染的细胞免疫 和粘膜免疫反应，打破免疫耐受。

此外，HPV是一个多型别的病毒，且缺乏群抗原决定簇，必须要开发多价疫苗 才能真正起到防治效果。不同地区HPV感染型别构成比存在差异。大多数地区是 HPV16和18型，少数地区如西非以HPV45型占优势，在南美则以HPV39型和HPV59型多 见。HPV58型在非洲、北美、南美洲、东南亚及欧洲均较为罕见，在宫颈癌中的感 染率只有2％；而在中国台湾和香港的宫颈癌患者中，感染率却相对较高，尤其在香 港的宫颈癌患者中，HPV58的检出率直追HPV16，高达33.3％。Huang等在对中国上海 部分宫颈癌患者肿瘤组织的研究中发现，HPV阳性标本中，HPV52和58的检出率达48 ％，而通常认为的主要致癌的HPV16和18型的阳性率仅为42％。最近陕西等地的统计 报导，宫颈癌患者中HPV58检出率亦高达近20％。由于多价疫苗开发不仅受载体容量 及生产成本等限制，不常见亚型的保护效果也很难证实，目前国外研究仍以1-2价 最常见病毒类型疫苗为主，国内对HPV58型感染亦未足够重视。迄今国际上进入临 床试验阶段的HPV候选疫苗中没有一个是针对58亚型的(包括Merck公司的HPV四价 疫苗)，这极可能导致相当长时间内进口疫苗在我国不适用。因此，自主开发针对 我国国情的HPV疫苗迫在眉睫。