[发明专利]检测巯基嘌呤甲基转移酶基因G460A多态性位点的试剂盒、方法和用途无效
| 申请号： | 200810113089.7 | 申请日： | 2008-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN101591699A | 公开（公告）日： | 2009-12-02 |
| 发明（设计）人： | 张彦明;于多;王燕;徐希平 | 申请（专利权）人： | 北京华安佛医药研究中心有限公司;深圳奥萨医药有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100176北京市北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 巯基 嘌呤 甲基转移酶 基因 g460a 多态性 试剂盒 方法 用途 | ||
1.一种荧光定量聚合酶链式反应方法检测巯基嘌呤甲基转移酶基因多态性的试剂盒，其特征在于，包含检测巯基嘌呤甲基转移酶G460A多态性位点的特异性引物、探针
2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，检测巯基嘌呤甲基转移酶G460A多态性位点的
正向引物为：5’-GGACGCTGCTCATCTTCTTAAAG-3’；
反向引物为：5’-CCATTTGCGATCACCTGGAT-3’。
3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，检测巯基嘌呤甲基转移酶G460A多态性位点的
野生型探针为：VIC-TAGAGGAGCATTAGTTG-MGB；
突变型探针为：FAM-AATAGAGGAACATTAGTTGC-MGB。
4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，含有PCR反应混合液和Taq DNA聚合酶。
5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述的PCR反应混合液含有100mM Tris-HCl、100mM KCl、5.0uM MgCl2、0.4mM dATP、0.4mM dCTP、0.4mM dGTP、0.4mM dTTP。
6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述的Taq DNA聚合酶的含量为1-10U/ul，优选5U/ul。
7.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，含有巯基嘌呤甲基转移酶G460A多态性位点野生型和突变型的阳性对照。
8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述的阳性对照选自基因组DNA、RNA或者克隆到载体上的DNA片段。
9.应用权利要求1-8所述的试剂盒检测巯基嘌呤甲基转移酶G460A多态性位点的方法。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述的检测巯基嘌呤甲基转移酶G460A多态性位点的基因扩增程序为：
95℃预变性10分钟；95℃变性15秒，58℃退火15秒，60℃延伸45秒，45个循环。
11.如权利要求1-9所述的试剂盒在预测嘌呤类药物的疗效和副作用中的用途。
12.如权利要求11所述的用途，其特征在于所述的嘌呤类药物是6-巯基嘌呤、6-巯代鸟嘌呤或巯唑嘌呤。
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