[发明专利]产氢工程菌及其应用

权利要求书

1.产氢工程菌，是如下a)或b)的工程菌：

a)灭活E.aerogenes IAM1183中的ΔhybO蛋白得到的工程菌；

所述ΔhybO蛋白的氨基酸序列是序列表中的序列1；所述ΔhybO蛋白的编码基因的核苷酸序列是序列表中的序列2；

所述灭活E.aerogenes IAM1183中的ΔhybO蛋白是通过将DNA片段Q导入所述E.aerogenes IAM1183中实现的；

所述DNA片段Q自上游至下游依次为同源臂T₁、DNA片段N、同源臂T₂；所述同源臂T₁和同源臂T₂能与所述ΔhybO蛋白的编码基因发生同源重组，灭活所述ΔhybO蛋白；所述DNA片段N为抗生素抗性片段；

所述同源臂T₁的核苷酸序列是序列表中的序列7；所述同源臂T₂的核苷酸序列是序列表中的序列8；所述DNA片段N为四环素抗性片段；

b)灭活E.aerogenes IAM1183中的ΔhybO蛋白和ΔhycA蛋白得到的工程菌；

所述ΔhycA蛋白的氨基酸序列是序列表中的序列4；所述ΔhycA蛋白的编码基因的核苷酸序列是序列表中的序列5；

所述灭活E.aerogenes IAM1183中的ΔhybO蛋白和ΔhycA蛋白是通过将DNA片段Q和DNA片段P导入所述E.aerogenes IAM1183中实现的；

所述DNA片段P自上游至下游依次为同源臂T₃、DNA片段M、同源臂T₄；所述同源臂T₃和同源臂T₄能与所述ΔhycA蛋白的编码基因发生同源重组，灭活所述ΔhycA蛋白；所述DNA片段M为抗生素抗性片段；

所述同源臂T₃的核苷酸序列是序列表中的序列9；所述同源臂T₄的核苷酸序列是序列表中的序列10；所述DNA片段M为卡那霉素抗性片段。

2.如权利要求1所述的工程菌，其特征在于：所述DNA片段Q的核苷酸序列为序列表中的序列3。

3.DNA片段Q，自上游至下游依次为同源臂T₁、DNA片段N、同源臂T₂；所述同源臂T₁和同源臂T₂能与E.aerogenes IAM1183的ΔhybO蛋白的编码基因发生同源重组，灭活ΔhybO蛋白；所述ΔhybO蛋白的氨基酸序列是序列表中的序列1；所述ΔhybO蛋白的编码基因的核苷酸序列是序列表中的序列2；

所述同源臂T₁的核苷酸序列是序列表中的序列7；所述同源臂T₂的核苷酸序列是序列表中的序列8；所述DNA片段N为四环素抗性片段。

4.如权利要求3所述的DNA片段Q，其特征在于：所述DNA片段N的核苷酸序列为序列表中的序列3。

5.含有权利要求3或4所述DNA片段Q的表达盒。

6.含有权利要求3或4所述DNA片段Q的重组表达载体。

7.含有权利要求3或4所述DNA片段Q的转基因细胞系。

8.含有权利要求3或4所述DNA片段Q的重组菌。