[发明专利]一种检测牛免疫球蛋白G的方法及其专用酶联免疫试剂盒

权利要求书

1.一种检测牛免疫球蛋白G的酶联免疫试剂盒，包括牛免疫球蛋白G的Fc 片段和牛免疫球蛋白G Fc片段的特异性抗体；所述特异性抗体为所述牛免疫球蛋 白G Fc片段的单克隆抗体；

所述单克隆抗体为由保藏号为CGMCC No.2436的牛免疫球蛋白G单克隆杂交瘤 细胞株分泌产生的抗体。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述牛免疫球蛋白G的Fc 片段和牛免疫球蛋白G Fc片段的特异性抗体以下述任一种形式存在：

1)所述牛免疫球蛋白G的Fc片段为包被原，所述特异性抗体进行酶标记后作 为酶标记物；

2)所述特异性抗体为包被原，所述牛免疫球蛋白G的Fc片段进行酶标记后作 为酶标记物。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括抗抗体； 所述抗抗体为羊抗鼠抗抗体或羊抗兔抗抗体；

所述牛免疫球蛋白G的Fc片段和抗抗体以下述任一种形式存在：

1)所述牛免疫球蛋白G的Fc片段为包被原，所述抗抗体进行酶标记后作为酶 标记物；

2)所述抗抗体为包被原，所述牛免疫球蛋白G的Fc片段进行酶标记后作为酶 标记物。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括牛免疫球 蛋白G标准品溶液、显色液、浓缩洗涤液、终止液、浓缩复溶液；所述终止液为 1-2mol/L的硫酸、盐酸溶液或氢氧化钠溶液；所述浓缩洗涤液为含有0.8-1.2％吐 温-20、0.02-0.05％叠氮化钠防腐剂、pH为6.5-7.4的0.1-0.2mol/L的磷酸盐缓 冲液；所述浓缩复溶液为含有0.05-0.2％的牛血清白蛋白，pH值为5.3-6.0的 0.05-0.1mol/L的磷酸盐缓冲液；所述百分含量为质量百分含量。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：所述酶标记中所用的标记酶 为辣根过氧化物酶或碱性磷酸酯酶；当标记酶为辣根过氧化物酶时，所述显色液由 显色液A液和显色液B液组成，显色液A液为过氧化氢或过氧化脲，显色液B液为 邻苯二胺或四甲基联苯胺，终止液为1-2mol/L硫酸或盐酸溶液；当标记酶为碱性 磷酸酯酶时，显色剂为硝基磷酸盐缓冲液，终止液为1-2mol/L氢氧化钠溶液。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于：所述终止液为2mol/L盐酸；所 述浓缩洗涤液为含有1.0％吐温-20、0.05％叠氮化钠防腐剂、pH值为7.4的0.1mol/L 的磷酸盐缓冲液；所述浓缩复溶液为含有0.1％牛血清白蛋白、pH值为5.6的 0.05mol/L磷酸盐缓冲液；所述百分含量为质量百分含量。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于：所述抗抗体进行酶标记的方法 是采用过碘酸钠法将所述标记酶与所述抗抗体进行偶联得到酶标抗抗体；所述过碘 酸钠方法中，所述标记酶与所述抗抗体的摩尔浓度比为2∶1。

8.一种检测牛免疫球蛋白G的方法，包括以下步骤：

1)样品前处理

将样品溶于氯化钠溶液中，混匀得到溶液I；用权利要求4中任一所述浓缩复 溶液稀释所述溶液I，取稀释液进行分析；

2)利用权利要求1-7中任一所述的酶联免疫试剂盒检测1)中所述稀释液。

9.由保藏号为CGMCC No.2436的牛免疫球蛋白G单克隆杂交瘤细胞株分泌产 生的牛免疫球蛋白G的单克隆抗体。

10.保藏号为CGMCC No.2436的牛免疫球蛋白G高效单克隆杂交瘤细胞株。