[发明专利]复合金属纳米结构检测金黄色葡萄球菌肠毒素的方法

权利要求书

1.复合金属纳米结构检测金黄色葡萄球菌肠毒素的方法，其特征在于包括下列步骤：

(1)选择基片，并清洗；在基片上自组装一层聚苯乙烯纳米球；

(2)用制作的聚苯乙烯纳米球自组装层做模具，采用真空蒸镀在纳米球自组装层上依次镀上均匀的金属银膜和金属金膜，此时纳米球的球与球之间的间隙会同时填充复合金属薄膜；

(3)通过Lift-off工艺去除聚苯乙烯纳米球自组装层，得到阵列化的复合金属纳米结构；

(4)在所述复合金属纳米结构上采用非定向共价连接法进行活化，在所述复合金属纳米结构表面形成一层抗金黄色葡萄球菌肠毒素羊单克隆抗体IgG的生物分子膜；

(5)采用光谱仪提取所述复合金属纳米结构的消光光谱，获得其生物结合前的消光谱峰值；

(6)将所述基片表面的所述复合金属纳米结构上滴待测溶液，待反应后吹干，并采用光谱仪提取反应后的所述复合金属纳米结构的消光光谱；

(7)将步骤(5)和步骤(6)的消光谱峰值对比，确定待测溶液中是否含有金黄色葡萄球菌肠毒素。

2.根据权利要求1所述的一种复合金属纳米结构检测金黄色葡萄球菌肠毒素的方法，其特征在于：所述步骤(1)中选择的所述基片为玻璃基片。

3.根据权利要求1所述的一种复合金属纳米结构检测金黄色葡萄球菌肠毒素的方法，其特征在于：所述步骤(1)中的聚苯乙烯纳米球直径为100nm～500nm。

4.根据权利要求1所述的一种复合金属纳米结构检测金黄色葡萄球菌肠毒素的方法，其特征在于：所述步骤(2)中金属银和金的膜层总厚度为40～60nm。

5.根据权利要求1所述的一种复合金属纳米结构检测金黄色葡萄球菌肠毒素的方法，其特征在于：所述步骤(4)中的在所述复合金属纳米结构表面形成的抗金黄色葡萄球菌肠毒素羊单克隆抗体IgG的生物分子膜为抗金黄色葡萄球菌肠毒素A型、或抗金黄色葡萄球菌肠毒素B型、或抗金黄色葡萄球菌肠毒素C型、或抗金黄色葡萄球菌肠毒素D型、或抗金黄色葡萄球菌肠毒素E型、或抗金黄色葡萄球菌肠毒素F型；分别对应于金黄色葡萄球菌肠毒素A型、B型、C型、D型、E型、F型的检测。

6.根据权利要求1所述的一种复合金属纳米结构检测金黄色葡萄球菌肠毒素的方法，其特征在于：步骤(4)中的采用非定向共价连接法对所述复合金属纳米结构进行活化的过程，在所述复合金属纳米结构表面采用亚二硫基二乙酸与纳米结构表面反应并用氮气吹干，然后将浓度0.3-0.4M的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐和浓度0.05-0.1M的N-羟基硫代琥珀酰亚胺的等体积混合溶液与纳米结构表面反应25至30分钟并用氮气吹干，将抗金黄色葡萄球菌肠毒素B型羊单克隆抗体IgG与纳米结构表面反应并用氮气吹干，最后用乙醇胺水溶液浸泡后，用氮气吹干备用。

7.根据权利要求1所述的一种复合金属纳米结构检测金黄色葡萄球菌肠毒素的方法，其特征在于：所述步骤(6)中的反应时间为10～30分钟。