[发明专利]中药金钱草抗结石分级提取物的制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，特别是用于预防和治疗尿结石的中药金钱草抗结石分级提取物的制备方法及其应用。

背景技术

尿结石(尿石症)为泌尿系统常见病，多发病。尿石症的发病率受遗传，营养，环境等多种因素影响。由于各民族生活习惯和饮食结构和遗传基因的不同，我国尿石症的发病率存在民族差异、年龄差异、性别差异。近几十年来，随着我国社会经济状况的改变，尿石症患者的构成发生了明显变化，尿石症分布的地区差异、年龄差异、性别差异明显缩小，发病率有逐年增加的趋势，目前我国尿石症的发病年龄高峰为21～50岁。尿结石可造成肾脏局部炎性浸润，并蔓延至周围组织，长期的结石压迫可引起梗阻，导致肾盂肾炎、肾积水、恶性病变、肾功能衰竭等一系列病理改变，严重影响国民健康和生活质量。

金钱草为报春花科植物过路黄(Lysimachia Christinae Hance)的干燥全草，又名大金钱草、对座草、路边黄、遍地黄等。主要分布于长江流域，北至陕西，南到贵州、四川、云南等省，其中以四川为主产地。金钱草味苦，酸，微寒，归肝，胆，肾，膀胱经。功能清热解毒，利尿排石，活血散淤。用于肝、胆结石，胆囊炎，黄疸性肝炎，泌尿系结石，水肿，跌打损伤，毒蛇咬伤，毒蕈及药物中毒；外用治化脓性炎症，烧烫伤。药理研究证明金钱草能显著促进大鼠胆汁分泌，明显降低致石豚鼠胆汁中游离胆红素和钙离子的含量，显著提高总胆汁酸的含量，抑制胆红素结石的形成[中药药理与临床.2004；20(2)：21-22]。金钱草是治疗尿结石的传统药物，疗效经多年的临床应用得到良好的验证。金钱草的治疗尿结石作用主要有三个方面：1、使碱性尿液酸性化，并起到溶石的作用；2、松弛、扩张膀胱、输尿管平滑肌，利于结石排出；3、显著利尿效应，增加肾盂、输尿管内压，起到推石下移的作用[中西医结合临床[J].2004；4(3)：44]。

目前金钱草作为中药治疗结石的金石之药，在抗结石复方中广泛应用，但迄今为止，其抗结石作用的物质基础—有效成分尚不明确。有研究认为槲皮素和山柰素是金钱草的主要药理活性成分[江苏药学与临床研究.2005；13(1)：31-33]，另外所含的黄酮类化合物具有酚羟基可能是抗氧化作用的主要活性基团[中成药，2005，27(2)：239-241]。

发明内容

本发明的目的是将金钱草分级提取，得到醇提物(JA)及四个分级产物，即石油醚部分(JB)、乙酸乙酯部分(JC)、正丁醇部分(JD)、水层部分(JE)，通过药理试验来证明中药金钱草提取物JA、JB、JC、JD、JE是抗结石的活性成分，明显降低大鼠尿液草酸和尿钙含量，明显降低肾组织损伤和结石沉积程度，明显抑制草酸钙晶体形成过程，延长结晶成核、形成、聚集的时间，延长三水草酸钙结晶向一水草酸钙结晶转化的时间，抑制结晶的数量，降低结晶的大小及密度，从而抑制草酸钙晶体形成，保护肾组织。中药金钱草提取物JA、JB、JC、JD、JE作为预防和治疗尿结石的活性成分，使直接、复合制成各种方便使用的药物制剂或作为食品添加剂用于尿结石的防治。

本发明采用金钱草药材为报春花科植物过路黄(Lysimachia christinaeHance)的干燥全草。金钱草药材用30～90％乙醇，80℃～100℃加热回流提取2～3次，每次0.5～2小时，过滤，合并两次滤液，回收乙醇，水浴浓缩得总提取物醇浸膏(JA)，再依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水、分步萃取3～4次，合并同类萃取液，回收溶剂，浓缩，分别得金钱草的分级提取物，即：石油醚部分(JB)、乙酸乙酯部分(JC)、正丁醇部分(JD)、水层部分(JE)。金钱草分级提取流程图，见说明书附图图1。

本发明通过药理试验证明了金钱草抗结石分级提取物的抗结石作用，是预防和治疗尿结石的活性成分。本发明金钱草分级提取物作为预防和治疗尿结石的活性成分，经直接、复合制成各种方便使用的药物制剂或作为食品添加剂，用于尿结石的防治。

本发明药效实验结果如下：

1、体内大鼠草酸钙结石模型试验：

金钱草抗结石分级提取物JA、JC、JD、JE可增加肾结石大鼠尿量，其中JA对尿量的增加较显著；降低尿钙、尿草酸的含量，其中JC、JE对尿液钙含量的降低有显著的统计学意义，JA、JE对尿液草酸含量的降低有显著的统计学意义；降低肾组织病变程度，减少肾组织草酸钙晶体量；降低肾组织骨桥蛋白表达量，从而抑制草酸钙结晶的肾组织的沉积。

2.体外草酸钙结晶动力学试验：