[发明专利]单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测用引物、试剂盒和检测方法

权利要求书

1.单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测用引物，其特征在于：所述的引 物为一套单增李斯特菌特征性引物组，一套引物组由两对引物组成，一对引 物为外引物，一对为内引物，序列分别为：

外引物1：GGTGATACTCTTTGGGGTAT

外引物2：CGTAATAATACTGTTATCAACACC

内引物1：GACCTGGTACGATTTTATCTGTTGTTTTTCGCACAAAGTAAAGGGAC

内引物2：ACAAGTAAATAATGAGGTTGCTGCTTTTTCGGACGTTTAACCAAGTTG。

2.单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测试剂盒，其特征在于：该试剂盒 包括如权利要求1所述的引物组、反应液、Bst DNA聚合酶、样品预处理液 和阳性对照液。

3.根据权利要求2所述的单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测试剂盒， 其特征在于：所述的引物组由体积比为1∶1∶4∶4的20-30μM外引物1、 外引物2、内引物1与内引物2组成。

4.根据权利要求2所述的单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测试剂盒， 其特征在于：所述的反应液是由体积比为5∶2∶1∶2的10×Thermopol反应 缓冲液、7.5～12.5mM dNTP，100-200mM MgSO₄与25～37.5M甜菜碱组成。

5.根据权利要求4所述的单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测试剂盒， 其特征在于：所述的10×Thermopol反应缓冲液含有200mM pH8.8三羟基 甲基氨基甲烷盐酸盐、100mM氯化钾、100mM硫酸铵、20mM硫酸镁和 体积百分比浓度为1％曲拉通X-100。

6.根据权利要求2所述的单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测试剂盒， 其特征在于：Bst DNA聚合酶每微升含8～16个活性单位。

7.根据权利要求2所述的单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测试剂盒， 其特征在于：样品预处理液是由20mM pH 8.0 Tris-HCl，2mM EDTA， 体积百分比浓度为1.2％曲拉通X-100组成。

8.根据权利要求2所述的单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测试剂盒， 其特征在于：该试剂盒还包括显色剂，显色剂为荧光染料。

9.根据权利要求2所述的单增李斯特菌环介导等温扩增技术快速检测试剂盒， 其特征在于：阳性对照液为单增李斯特菌标准菌株基因组DNA。