[发明专利]普陀鹅耳枥种胚培养基及组培快繁方法无效
申请号: | 200810121615.4 | 申请日: | 2008-10-14 |
公开(公告)号: | CN101402937A | 公开(公告)日: | 2009-04-08 |
发明(设计)人: | 黄丽春;俞慈英;张翠萍;李修鹏;林新春 | 申请(专利权)人: | 浙江林学院 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 | 代理人: | 周 烽 |
地址: | 311300浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 普陀 鹅耳枥种胚 培养基 组培快繁 方法 | ||
1、一种普陀鹅耳枥种胚培养基,其特征是由下列原料配比而成:WPM盐类、MT维生素、0.001-0.1mg/L的BA即苄氨基腺嘌呤、50-150mg/L的肌醇、占培养基总重量0.2%-0.4%的水晶洋菜和1.5%-4.5%的蔗糖,培养基的pH值5.0-6.0。
2、一种用如权利要求1所述的普陀鹅耳枥种胚培养基进行组培快繁方法,包括如下操作步骤:
1)外植体的采集与选择:要求种子的长度5-6毫米,种胚的长度0.8-1.2mm,发育成熟的种子;
(2)种子的洗净、灭菌与取种胚:将成熟种子冲水四个小时并用蒸馏水清洗干净后,放入1%次氯酸钠的溶液中真空抽滤灭菌10min,然后无菌水冲洗5次,在无菌操作台上,利用解剖显微镜用剪刀及小镊子剥去种壳并用刀尖挑取种胚;
(3)接种与培养:将切得的普陀鹅耳枥种胚接种到WPM盐类、MT维生素、0.001-0.1mg/L的BA即苄氨基腺嘌呤、50-150mg/L的肌醇、占培养基总重量0.2%-0.4%的水晶洋菜和1.5%-4.5%的蔗糖种胚培养基中,暗培养2d后再置于光照周期16h/d、光照强度2500Lux的冷光灯下、环境温度25±2℃中继续培养26d,共28d,便出现新绿色的生有根的试管苗;
(4)继代与诱导生根:将该生根的试管苗去根进行继代培养,每4周继代一次,经1-2次继代,即可诱导植株生根;
(5)驯化移栽:将生根良好的幼苗移至驯化室、光照强度20000Lux、驯化1-2周,将苗从试管取出,用温水冲洗苗根部培养基,再用冷水冲洗,移栽至体积比为蛭石∶珍珠岩∶泥炭=1∶1∶1混合而成的盆装人工基质中,每盆苗套上透明塑料袋,每隔3天将袋子剪一小口,9-12d去袋移至温室即成。
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