[发明专利]一种抗人巨细胞病毒gBn1抗体及制备方法与专用抗原

权利要求书

1、一种制备抗人巨细胞病毒gBn1抗体的专用抗原，其特征在于：其氨基酸序列为：SEQ NO.1。

2、一种制备抗人巨细胞病毒gBn1抗体的专用抗原，其特征在于：是氨基酸序列SEQ NO.1与KLH交联的多肽。

3、一种抗人巨细胞病毒gBn1抗体，其特征在于：用权利要求1或2所述的专用抗原免疫动物，再从所免疫的动物中分离、纯化血清所得到的抗体。

4、一种制备抗人巨细胞病毒gBn1抗体的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)用权利要求1或2所述的专用抗原免疫动物，将gBn1专用抗原100ug与弗氏完全佐剂等体积混合，充分乳化后经动物背部皮内组织进行多点注射；4周后加强免疫，改用弗氏不完全佐剂，注射方法不变；2周后再经过两次加强免疫，每次间隔2周；第四次免疫后两周再加强免疫一次；

(2)从步骤(1)得到的免疫动物中取血，分离、纯化血清，得到gBn1抗体。

5、根据权利要求4所述的制备抗人巨细胞病毒gBn1抗体的方法，其特征在于所述步骤(2)中血清的的纯化方法为：

(1)血清用冷PBS液稀释5倍后，于10000转离心30min，去沉淀；

(2)将预装有Sepharose-protein G的抗体纯化柱用10倍柱床体积的Binding Buffer充分流洗；

(3)将稀释的血清上柱，控制流速8～10滴/分钟；

(4)将流穿的血清重复上柱；

(5)用20倍柱床体积的Binding Buffer充分洗涤，直至流穿液A280吸光值小于0.01；

(6)用E]ution Buffer洗脱结合的抗体，控制流速8～10滴/分钟，收集洗脱液于预加有0.1ml的磷酸钾缓冲液(PH7.9，0.5M)的收集管中，每管收集0.5ml洗脱液；

(7)于A280nm检测每管洗脱液的吸光度，并收集吸光值大于0.2的洗脱液；

(8)将收集的洗脱液置于透析卡中，并于0.1M PH7.0的PBS中透析；每隔6小时换液一次，共透析48小时；

(9)将纯化的抗体溶液按1:100稀释后，于280nm测蛋白含量；

(10)将纯化的抗体加叠氮钠防腐后分装于小管中，置于低温冰箱备用。

6、抗人巨细胞病毒gBn1抗体在检测HCMV感染患者的gB分型的应用。

7、抗人巨细胞病毒gBn1抗体的制备疫苗的应用。

8、抗人巨细胞病毒gBn1抗体作为抗体芯片的应用。

9、抗人巨细胞病毒gBn1抗体用于研究CMV gB蛋白及其抗体结构及功能的应用。