[发明专利]一种Solexa技术鉴定糖尿病人血清微小核糖核酸的方法无效
申请号: | 200810123041.4 | 申请日: | 2008-07-15 |
公开(公告)号: | CN101307362A | 公开(公告)日: | 2008-11-19 |
发明(设计)人: | 张峻峰;郭继刚;张玉婧;陈江宁;陈熹;殷媛;蔡星;王可慧;张辰宇;王进;曾柯 | 申请(专利权)人: | 南京大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 南京知识律师事务所 | 代理人: | 胡锡瑜 |
地址: | 210097*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 solexa 技术 鉴定 糖尿病人 血清 微小 核糖核酸 方法 | ||
1、一种Solexa技术鉴定糖尿病人血清中微小核糖核酸的方法,其特征是由以下步骤构成:
(1)收集正常受试者和初发糖尿病受试者的血清样本;
(2)通过Trizol试剂提取血清总RNA;
(3)进行PAGE电泳回收17-27nt RNA分子;
(4)进行Solexa技术的准备实验,在17-27nt RNA分子两个末端加上接头adapter;
(5)小RNA接头分子一端固定在Solexa芯片表面上,并进行“桥式”PCR扩增反应;
(6)利用可逆性末端终结反应,通过四种荧光碱基的合成进行测序;
(6)数据分析与处理。
2、根据权利要求1方法所制备的用于鉴定糖尿病人血清微小核糖核酸试剂盒,其特征为:
(1)该试剂盒包含测定糖尿病血清微小核糖核酸的工具,包括酶,dNTP及仪器;
(2)此试剂盒只需要糖尿病人血液而不需要其它组织样品;
(3)此试剂盒包含糖尿病人血清与正常人血清相比发生变化的微小核糖核酸中的一种或几种引物;
(4)此试剂盒用定量或半定量PCR技术测定作为疾病标记物的一类血清微小核糖核酸表达量的变化程度,从而诊断糖尿病发生与否和疾病程度。
3、权利要求1所述的Solexa技术或权利要求2所述的用于诊断糖尿病的血清微小核糖核酸试剂盒在诊断和鉴定糖尿病中的应用。
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