[发明专利]青春双歧杆菌grx066及其制备方法、用途

说明书

技术领域

本发明涉及功能性乳制品生产技术领域。

技术背景

乳酸菌的降血压作用在于其能够代谢产生蛋白酶，从而降解蛋白质，产生ACE活性抑制肽。乳酸菌代谢产生的蛋白酶，包括肽链内切酶以及氨基肽酶等，在这些酶系的作用下，限制性水解蛋白质，产生分子大小以及作用各有差异的生物活性肽段，其中包括已经发现的具有抑制血管紧张素转换酶(Angiotensin Converting Enzyme，ACE)活性的小肽。

发酵乳制品的降血压作用的强弱与其所使用的乳酸菌的种类密切相关。从自然环境中筛选出适合生产降血压发酵产品的乳酸菌具有重要的意义。我国自古就有“药食同源”的说法，通过改善饮食状况预防和治疗疾病。源于牛乳中蛋白的降压肽只对高血压患者起降压的作用，对正常血压无降压作用，这些肽又是利用酶解产生，安全性高。如将具有降压作用的乳酸菌与降血压肽结合开发成保健食品，长期服用可预防、缓解和辅助治疗高血压，这种方式必将为人们所接受。随着人们生活水平的提高，人们越来越重视食品的天然性和功能性，因此将降血压肽和益生菌结合生产功能性酸乳，具有十分广阔的前景。

发明内容

本发明的第一目的是提供一种具有较强降血压作用的青春双歧杆菌。

本发明青春双歧杆菌grx066，于2008年3月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所。保藏编号：CGMCC NO.2406，分类命名：青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)。

经试验验证，本发明所述青春双歧杆菌grx066对低pH和高胆汁酸盐具有抗性，表明本发明菌株具有耐受人消化道不良环境能力。

利用本发明菌株发酵牛乳，可以大量产生具有抑制血压升高的活性物质-血管紧张素转换酶抑制肽(Angiotensin I-Converting Enzyme Peptide，ACEIP)。即利用热处理(如95℃/5分钟)冷却到37℃后的牛乳接种2％～5％的本发明菌株，经37℃培养16～18小时，此时发酵乳对ACE的抑制活性最大，表明本发明菌株、代谢产物及分解产物具有很强的抑制血管紧张素转换酶的活性。

本发明的第二目的是发明青春双歧杆菌grx066的制备方法。

包括以下步骤：

(1)通过培养基从传统乳制品中分离获得乳酸菌；

(2)利用酶比色法筛选出其发酵乳抑制血管紧张素转换酶(AngiotensinI-Converting Enzyme，ACE)活性比较强的菌株；

通过细菌形态学、生理学和培养特征，并通过法国梅埃里公司API系列鉴定试剂条和16SrRNA进行分析鉴定，证实了通过以上方法制备的菌株是具有较强抑制血压升高的青春双歧杆菌菌株grx066。

本发明的第三目的是发明青春双歧杆菌grx066的用途。

青春双歧杆菌grx066可用于生产具有降血压功能的乳制品。

将青春双歧杆菌grx066与液态乳共发酵后用于制备酸奶或乳酸菌饮料或冰淇淋。

也可将青春双歧杆菌grx066培养物经冷冻干燥用于生产具有降血压功能的食品。

由于乳制品中含有青春双歧杆菌grx066而成为具有辅助治疗和稳定高血压症状作用的一种食疗性产品。

附图说明

图1为本发明所述青春双歧杆菌grx066经平板培养的菌落形态观察图。

图2为本发明所述青春双歧杆菌grx066经革兰氏染色的普通光学显微结构照。

具体实施方式

一、样品来源

本例菌株来源于我国新疆民族传统乳制品-酸马奶。酸马奶俗称马奶酒，是我国蒙古族和哈萨克族等少数民族地区的传统乳制品，是一种珍贵的发酵乳产品。

二、从酸马奶中分离出乳酸菌

将新疆民族传统乳制品酸马奶样品接种到MRS培养物中于37℃培养24小时。将该培养物涂布在MRS琼脂平板上，然后在37℃厌氧培养3天。培养后，收集在琼脂培养基上出现的菌落，并进一步纯化，用其检测细菌特征，如下文所述的革兰氏染色模式(如图2)、糖酵解能力等。

将分离获得的菌株用含11％脱脂乳的肉汤培养物培养后加入保护剂冻干，保存在-18℃，然后用于各种检测细菌特征的试验。

三、体外筛选具有抑制能力强的菌株

本发明主要通过比较其不同分离菌株发酵乳的ACE抑制活性，从而获得抑制血管紧张素转换酶能力强的益生菌。