[发明专利]以颜色和形状复合编码的水凝胶非标记多元免疫检测方法无效
申请号: | 200810124479.4 | 申请日: | 2008-07-08 |
公开(公告)号: | CN101368949A | 公开(公告)日: | 2009-02-18 |
发明(设计)人: | 赵祥伟;扈靖;赵远锦;李娟;赵文举;顾忠泽 | 申请(专利权)人: | 东南大学 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N33/532 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 | 代理人: | 叶连生 |
地址: | 21009*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 颜色 形状 复合 编码 凝胶 标记 多元 免疫 检测 方法 | ||
1.一种以颜色和形状复合编码的水凝胶非标记多元免疫检测方法,其特征在于检测步骤为:
第一步,制备各种不同形状不同颜色的光子晶体水凝胶薄膜:将质量体积比为10%的非紧密堆积型二氧化硅胶体晶体用丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺混合液稀释至质量体积比在3%~6%范围内的具有不同浓度的一组溶液,分别加入光引发剂,排出空气,灌入模具中,在不同浓度的光子晶体凝胶聚合前体溶液的模具上加盖不同形状的掩模,静置20~30min,然后经紫外光照射聚合40~60min,即得不同形状不同颜色的光子晶体水凝胶薄膜,将所得到的光子晶体水凝胶薄膜从模具上剥落,洗涤后置于纯水中保存;
第二步,制备多元免疫检测用具有复合编码的光子晶体水凝胶薄膜:将一种颜色或一种形状作为一种编码,选取由第一步制得的具有不同颜色或者不同形状的光子晶体水凝胶薄膜,在具有同种编码的水凝胶薄膜表面包被同种特异性抗原或者抗体制成一种免疫水凝胶薄膜,将分别制备好的免疫水凝胶薄膜用磷酸盐缓冲液洗涤,封闭缓冲液之后,测定得到的每种复合编码光子晶体水凝胶薄膜的反射光谱,将制备的各种不同形状和不同颜色的水凝胶薄膜进行混合,即得到多元免疫检测用具有复合编码的光子晶体水凝胶薄膜;
第三步,检测:将第二步得到的多元免疫检测用具有复合编码的光子晶体水凝胶薄膜与待测样品混合进行抗原和抗体的特异性结合反应,反应完毕,用洗涤缓冲液洗涤,分别测定每个光子晶体水凝胶薄膜的反射光谱,同时与没有反应前光子晶体水凝胶薄膜的反射光谱相对比,结合形状以确定其编码,根据编码就能够确定待测抗原或者抗体的种类以及含量。
2.如权利要求1所述的以颜色和形状复合编码的水凝胶非标记多元免疫检测方法,其特征在于所述的光子晶体水凝胶薄膜的形状为星形、三角形、圆形、正方形、正五边形中的任意一种或几种。
3.如权利要求1所述的以颜色和形状复合编码的水凝胶非标记多元免疫检测方法,其特征在于所述的第三步中的待测样品可以是体液、组织液、细胞裂解液、血液、血清中的病原微生物抗原或其抗体、细胞因子、肿瘤标志物、自身抗体、激素、神经递质、毒品、兴奋剂、各种细胞表面的可溶性标记或者各种可溶性受体分子中的任意一种或几种。
4.如权利要求1所述的以颜色和形状复合编码的水凝胶非标记多元免疫检测方法,其特征在于第一步中的光引发剂为偶氮异二丁腈。
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