[发明专利]一种聚合低谷蛋白和抗条纹叶枯病的水稻品种的选育方法

说明书

一、技术领域

本发明为一种聚合低谷蛋白和抗条纹叶枯病的水稻品种的选育方法，属于低谷蛋白和抗条纹叶枯病水稻新品种的聚合育种方法，专用于适合肾脏病及糖尿病人食用稻米且抗条纹叶枯病品种的选育。

二、背景技术

近年来由于我国城乡居民生活习惯和生态环境等的改变，我国肾脏病和糖尿病患者的人数在不断增加，据统计，近年来全国糖尿病患者总人数超过1亿人，其中有近600万人因糖尿病并发肾脏病而接受住院治疗。肾脏病及糖尿病(并发肾脏病)患者的蛋白质代谢机能障碍，在治疗期间不能食用可吸收蛋白含量超过4％的大米，因此采用低蛋白的饮食配合治疗是一种有效的措施，而目前我国尚无专用的低蛋白质大米品种，而以代用品进行饮食配合治疗，这无疑增加了患者的经济和精神负担，降低了医疗效果。

众所周知，通常稻米中的全蛋白根据其在不同溶剂中的溶解性可以分为清蛋白、球蛋白、谷蛋白和醇溶蛋白四大类，其中谷蛋白占全蛋白含量的60％以上，是稻米中可为人体吸收蛋白的主要成分；醇溶蛋白则不能被人体所吸收。因此，对于肾脏病和糖尿病患者来讲，所需要的是低谷蛋白(即低可吸收蛋白)含量的大米。目前本实验室已选育出低谷蛋白水稻品种W3660，单粒稻米中可吸收蛋白(包含清—球蛋白和谷蛋白)含量3.35％，谷蛋白含量低，为1.82％(表2)，并进行了示范试种，但该品种存在产量低、不抗条纹叶枯病等缺点，因此，需要进一步提高产量和品种抗性。

三、发明内容

技术问题 本发明的目的是提供一种聚合低谷蛋白和抗条纹叶枯病的水稻品种的选育方法，培育出产量与目前主栽品种相当，而可吸收蛋白(包含清—球蛋白和谷蛋白)在4％以下且抗条纹叶枯病的功能保健水稻新品种，解决我国低谷蛋白大米品种产量低、抗性差的问题，培育优质高产多抗的适合肾脏病、糖尿病人食用的水稻品种。

技术方案

一种聚合低谷蛋白和抗条纹叶枯病的水稻品种的选育方法，包括：

1)以W3660(品种权号CNA20020113.1)为母本、镇稻88(1997年苏种审字第265号)为父本进行杂交，从杂种F₂代开始，在杂交后代群体中，选择12粒稻米中全蛋白的SDS-PAGE蛋白带型与W3660全蛋白带型(江绍玫等，水稻谷蛋白突变体的筛选与遗传分析，遗传学报，2003，30(7)：641-645))一致，同时，在植株农艺性状上，选择生育期、株高、株叶形态等性状与镇稻88(参照文献盛生兰等，水稻中粳新品种——镇稻88.江苏农业学报，1998，14(3)：148)一致的单株种植。

2)进行分子标记WW1的辅助选择，苗期各单株取叶片提取DNA，用WW1标记引物：

左端引物序列5′TTGGTGTGCCATTGTTTTTT3′

右端引物序列5′AACTGTTGAGACCTGCTTTT3′

扩增上述各单株DNA，选择仅得到扩增片段长度237bp的条带、没有扩增片段长度222bp的条带的纯合W3660基因型的植株；

对获得的植株再进行SDS-PAGE蛋白带型的验证，选择植株全蛋白带型与W3660带型一致，生育期、株高、株叶形态性状与镇稻88一致的单株种植；选择2代后，获得谷蛋白含量与W3660一致的株系；

3)对获选的株系开展抗条纹叶枯病分子标记R15的辅助选择，提取各植株叶片的DNA，用R15标记引物：

左端引物序列5′GGGCTTTCAACTCGTACTCTG3′

右端引物序列5′ATGAACTGCGGGTCCAATAA3′

选择仅得到扩增片段长度363bp的条带、没有得到扩增片段长度357bp的条带的纯合镇稻88基因型的植株，对获得的植株再进行抗条纹叶枯病的田间接种(丁秀兰等.利用回交重组自交群体检测水稻条纹叶枯病抗性位点.作物学报，2005，31(8)：1041-1046)和人工接种(丁秀兰等，利用回交重组自交群体检测水稻条纹叶枯病抗性位点.作物学报，2005，31(8)：1041-1046)鉴定，选出抗性与镇稻88一致；且生育期、株高和株叶形态性状与镇稻88一致的单株种植，获得株系，定名W1721。

以上述方法育成的水稻新品种W1721品种谷蛋白含量与W3660一致，可吸收蛋白(包含清—球蛋白和谷蛋白)含量小于4％，抗条纹叶枯病，简单重复序列(SSR)指纹图谱具有WW1标记的低谷蛋白特征谱带237bp，R15标记的抗条纹叶枯病特征谱带363bp。

有益效果 与现有技术相比，本发明所提供的一种聚合低谷蛋白和抗条纹叶枯病的水稻品种的选育方法，具有如下优点：