[发明专利]检测自身免疫疾病相关抗核抗体谱的试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种检测自身免疫疾病相关抗核抗体谱的试剂盒，包括：反应卡、酶 联试剂、显色剂、终止液和浓缩洗涤液，其特征在于：所述反应卡由载片和 固定在载片之上的包被有15条平行的抗原检测线的硝酸纤维素膜或尼龙膜所 组成，该抗原检测线分别由nRNP/Sm、Sm、SS-A、Ro-52、SS-B、Scl-70、Jo-1、 核小体、dsDNA、组蛋白、核糖体P蛋白、AMA-M2、PM-Scl、CENP B或PCNA 彼此独立的划线到硝酸纤维素膜或尼龙膜上，4℃包被16-24个小时而形成；

所述的nRNP/Sm，Sm，SS-A，SS-B，Scl-70，Jo-1，核小体，dsDNA，组 蛋白，核糖体P蛋白和AMA-M2为天然抗原；

所述的nRNP/Sm，Sm，SS-A，SS-B，Scl-70，Jo-1，核小体，dsDNA，组 蛋白和核糖体P蛋白采用丙酮法从犊牛胸腺组织中提取得到；

所述的AMA-M2采用丙酮法从猪心组织中提取得到；

所述的Ro-52，PM-Scl，CENP B和PCNA是通过利用杆状病毒表达系统在 Sf9细胞中表达Ro-52，PM-Scl，CENP B和PCNA基因，分别得到Ro-52，PM-Scl， CENP B和PCNA重组抗原；

所述的酶联试剂为碱性磷酸酶标记的羊抗人IgG；所述的显色剂为5-溴 -4-氯-3-吲哚-磷酸；所述的终止液为1×磷酸盐缓冲液；所述的浓缩洗涤液 为10×磷酸盐缓冲液；

其中，所述的硝酸纤维素膜或尼龙膜还含有1条由抗羊IgG划线而成的 对照线；

所述的自身免疫疾病包括系统性红斑狼疮，混合性结缔组织病、干燥综 合症、系统性硬皮病、多发性肌炎或皮肌炎。

2.按照权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述的硝酸纤维素膜或 尼龙膜上的每一检测线对应于或者置于载片反应区中彼此分隔的一个相对独 立的反应槽中。