[发明专利]诊断马流感病毒和鉴定其亚型的多重RT-PCR方法有效
申请号: | 200810132409.3 | 申请日: | 2008-07-15 |
公开(公告)号: | CN101328508A | 公开(公告)日: | 2008-12-24 |
发明(设计)人: | 郭巍;戴伶俐;李雪峰;赵利平;相文华;周建华 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 | 代理人: | 孙皓晨;费碧华 |
地址: | 150001黑龙江*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 诊断 流感病毒 鉴定 多重 rt pcr 方法 | ||
1.一套用于诊断马流感病毒和鉴定其亚型的多重RT-PCR引物,其特征在于:其核甘酸序列为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2,SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示;其使用方法包括:以待检样品的RNA为模板,以SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2,SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4两组核苷酸序列为多重引物进行RT-PCR反应;如果从待检测的样品中只扩增出了227bp的产物,则该样品为马流感病毒的H7N7亚型;如果从待检测的样品中同时扩增出了227bp和595bp的产物,则该样品为马流感病毒的H3N8亚型;如果从待检测的样品中未扩增出227bp的产物,则该样品不含有马流感病毒。
2.按照权利要求1所述的多重RT-PCR引物,其特征在于:所述PCR反应的退火温度选自48.8℃、51.2℃、53.6℃或55.9℃。
3.按照权利要求2所述的多重RT-PCR引物,其特征在于:所述PCR反应的退火温度是53.6℃。
4.按照权利要求1所述的多重RT-PCR引物,其特征在于:所述PCR反应的循环次数为30次循环或35次循环。
5.按照权利要求4所述的多重RT-PCR引物,其特征在于:所述PCR反应的循环次数为30次循环。
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