[发明专利]一种测定红花黄色素含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种红花黄色素检测方法，具体地说，涉及一种检测红花黄 色素及含量的方法。属于药物领域。

背景技术

红花属菊科植物红花Carthamus tinctorius L.的干燥花，具有活血化淤、通 经之功效。红花是当今世界研究和应用的“热点”植物之一，对它的化学成 分的研究，已有大量文献报导，红花黄色素经药理研究证明是红花的主要药 效部位，其中主要活性成分为红花黄色素。

现有技术已有大量红花黄色素或者红花黄色素有效部位及其制剂的文献 报道。关于红花黄色素或者红花黄色素的测定方法，也有一些报道。为了有 效地控制红花黄色素或者红花黄色素药物制剂质量，确保原料或者中间体品 质，需要提供一种便捷、有效地红花黄色素产品质量品价方法，特别是检测 方法，从而可以保证药品制剂质量有效和可控。

发明内容

为此，本发明主要目的是提供一种有效、可控、便捷地检测红花黄色素 的方法，进而可以有效地评估红花黄色素产品质量和品质。

为实现上述发明目的，本发明技术方案如下：

本发明提供一种检测红花黄色素的方法，其包括如下步骤：

(1)红花黄色素的检测，用薄层色谱法或者紫外分光光度法检测红花黄色素 的供试品中红花黄色素；

(2)总黄酮的含量测定，用紫外分光光度法，以羟基红花黄色素A为对照品， 测定波长为360nm，测定红花黄色素的供试品中总黄酮含量；

(3)羟基红花黄色素A的含量测定，用高效液相色谱法，以羟基红花黄色素 A为对照品，用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，用甲醇、乙腈、水和 磷酸的混合溶剂为流动相，测定波长为360nm，理论塔板数按羟基红花 黄色素A峰计算应不低于3000，测定红花黄色素供试品中羟基红花黄 色素A的含量。

本发明所述的红花黄色素，均系从红花中提取、分离、纯化得到的总黄 酮，可以通过现有技术已知方法从红花原药材中提取、分离、纯化得到红花 黄色素。例如CN1600817A、CN1935176A、CN101007828A等专利申请中公 开的红花中提取、分离、纯化得到的红花黄色素或者红花黄色素或者红花提 取物产品等。前述专利申请公开内容引入本申请作为参考。

本发明上述所述的方法，其中步骤(1)红花黄色素的检测，可以通过薄 层色谱法检测。例如可以红花黄色素作为对照品，采用聚酰胺薄层色谱、硅 胶薄层色谱等方法检测供试品中的红花黄色素。也可以采用紫外分光光度法， 检测样品在一定波长范围内测定其最大吸收波长，测定样品中的红花黄色素。

其中，作为优选实施方案，本发明采用薄层色谱法检测红花黄色素的供 试品中红花黄色素。并且优选步骤(1)所述的薄层色谱，是以聚酰胺为吸附 剂，水、乙醇、甲酸和乙酰丙酮的混合溶剂为展开剂，以羟基红花黄色素A 为对照品，薄层色谱展开后，供试品与对照品色谱相应的位置尚显现相同的 点。

其中，更加优选所述的展开剂为水、乙醇、甲酸和乙酰丙酮的混合溶剂， 按体积比配伍，水∶乙醇∶甲酸∶乙酰丙酮为5∶1.5∶1∶0.5的混合溶剂。

作为本发明的另一实施方案，其中步骤(1)紫外分光光度法检测红花黄 色素的供试品中红花黄色素，在221～227nm波长处有最大吸收峰。

其中，本发明上述所述的检测方法，其中步骤(3)中所述的流动相，优 选按体积比配伍，甲醇∶乙腈∶水∶磷酸为32∶3∶64.5∶0.5的混合溶剂。

本发明另一目的，是提供一种检测注射用红花黄色素的方法，其中所述 的红花黄色素系从红花中提取分离、纯化得到的总黄酮，其包括如下步骤：

(1)红花黄色素的检测，用薄层色谱法或者紫外分光光度法检测出注射用红 花黄色素中的红花黄色素；

(2)总黄酮的含量测定，用紫外分光光度法，以羟基红花黄色素A为对照品， 检测波长为360nm，测定出注射用红花黄色素中的总黄酮含量；

(3)羟基红花黄色素A的含量测定，用高效液相色谱法，以羟基红花黄色素 A为对照品，用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，用甲醇∶乙腈∶水∶磷酸 的体积比为32∶3∶64.5∶0.5的混合溶剂为流动相，检测波长为360nm，理 论塔板数按羟基红花黄色素A峰计算应不低于3000，测定出注射用红 花黄色素中的羟基红花黄色素A含量。