[发明专利]可鉴别断奶仔猪F4腹泻易感性/抗性的MUC13分子标记及应用

说明书

技术领域

本发明涉及动物分子生物学技术及育种领域，尤其是涉及一个可鉴别断奶仔猪F4腹泻易感性/抗性的MUC13分子标记及应用。

背景技术

畜禽传染病每年给全世界畜禽生产造成巨额的经济损失，发达国家由此造成的损失占年交易额的17％(17亿英磅)，在发展中国家高达35％-50％。仔猪腹泻病是最普遍而且非常重要的疾病，因腹泻病引起的仔猪死亡率达11.5％-29.5％，其中因大肠杆菌引起的发病率和死亡率占整个猪腹泻发病率与死亡率的56.2％和24.7％。大肠杆菌病严重影响仔猪生长发育，导致饲养成本增高，给养猪业带来巨大经济损失，采用疫苗接种或采用抗菌类药物对该病进行防治，一方面长时间使用容易引起耐药性，另外药物的滥用将导致畜产品药物残留而成为药物食品，最终影响人类的健康。值得一提的是致病性大肠杆菌(Eschoerchia coli，E.coli)的抗原特性是可变的，已发现的E.coli菌体O抗原血清型就有164种，给研制疫苗及药物治疗带来很大困难，因此从根本上开展猪对E.coli抗性的遗传机制研究，将开辟仔猪腹泻抗病育种新途径。

Soderlind O等的研究表明，大肠杆菌病中又主要是由产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Eschoerchia coli ETEC)F4引起，ETEC F4经黏附定居于宿主小肠上皮细胞后，发挥空间阻碍作用，不被肠蠕动或分泌物的清洗而排除，并大量繁殖，分泌肠毒素，导致细胞吸收障碍，引起腹泻，甚至致死。F4黏附素由Rskov等发现并命名，根据其免疫学特征可分为F4ab、F4ac、F4ad。

Sellwood等首次报道了1头对E.coli F4ac黏附素引起的腹泻具有抗性的猪，其抗性是由于小肠粘膜缺乏相应的受体。E.coil F4ac黏附的受体遵循孟德尔遗传，显性基因S表达有受体蛋白，猪只表现为对E.coli F4ac敏感，隐性基因s不表达受体蛋白，表现为抗性。Bijlsma报道F4ab和F4ac两个受体位点在遗传上较紧密连锁(θ＝0.02)，同时揭示转铁蛋白位点(Tf)与F4ac受体位点连锁。Edfors-Lilja等用瑞典约克夏×欧洲野公猪资源家系为材料，经过三代系谱的连锁分析，将F4ab和F4ac受体定位于13号染色体，并确定了F4ab和F4ac受体位点紧密连锁(θ＝0.01)。Grange等对F4受体的性质做了一系列详细的研究，在猪小肠上皮细胞分离到两种粘液型唾液糖蛋白(Intestine mucus glycoprotein)，分子量分别210kDa(IMTGP-1)和240kDa(IMTGP-2)，这两种蛋白被认为是猪对F4ab和F4ac易感性和抗性重要的决定因子。丹麦等5个国家的科研单位通过合作进一步将肠毒素大肠杆菌F4ac受体位点精细定位于猪13号染色体q41区域。MUC13基因位于该区域，结合其生理生化功能分析，认为MUC13基因极有可能是肠毒素大肠杆菌F4ac受体的一个重要候选基因。

鉴于以上背景情况，申请人深入开展了猪MUC13基因的SNPs(单核苷酸多态性)的搜寻、鉴定及其影响仔猪腹泻病性状的研究，以期建立标记辅助选择技术开展断奶仔猪腹泻病的抗病育种工作。

发明内容

本发明的第一个目的是提供一个可鉴别西方猪种断奶仔猪F4腹泻易感性/抗性的MUC13分子标记，通过现代分子生物学技术检测该多态位点，利用标记辅助选择(MAS)选择有利的等位基因型个体留种，可以显著提高种群断奶仔猪的抗腹泻病能力，大大减少仔猪死亡率。

本发明的第二个目的是MUC13分子标记在选育改良种猪抗腹泻病性状中的应用。

本发明的第一个目的是这样实现的：

(1)单核苷酸多态性(SNP)A157G的鉴别：