[发明专利]一种siRNA在制备抑制肿瘤迁移药物中的用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一个生存素survivin基因为靶标的小分子干扰RNA(siRNA)在制备抑制肿瘤迁移药物中的用途。

背景技术

恶性肿瘤是当前威胁人类生命健康的主要杀手之一，目前还没有找到真正有效的根治方法，这迫使科研工作者不断寻找新的技术和方法，试图从根本上攻克癌症。

RNA干扰技术(RNAi)是近几年发展起来的被认为是研究功能基因组最有力工具之一。这种新兴的生物技术为肿瘤分子水平的基因治疗提供了新的技术和方法。RNA干扰(RNAinterference，RNAi)是由双链RNA(double stranded RNA，dsRNA)dsRNA)介导的转录后的基因沉默(post-transcriptional gene silencing，PTGS)现象。通过在多种生物细胞内导入外源或内源的dsRNA可以使内源性mRNA发生特异性降解，从而引起相应基因转录的阻抑。RNAi已作为一种简单有效的基因敲除的技术，广泛地应用于功能基因组学研究以及抗病毒、抗肿瘤治疗的研究中。

Survivin是1997年耶鲁大学Aitieric.DC等人在人类基因组库中首先筛选分离出来的IAP(凋亡抑制蛋白)家族的一个成员。它定位于17q25，该基因几乎在所有种类的肿瘤组织中特异性地表达，而正常组织几乎没有表达；该基因在肿瘤细胞中高表达后，不但促进肿瘤细胞抗凋亡、促进肿瘤细胞有丝分裂、参与血管形成和放化疗耐受多种功能，而引起了国内外学者的广泛关注。

有研究者(.Lab Invest，1999，79(11)：1327-1333；Am J Pathol，1998，152(1)：43-49)对正常增殖细胞中survivin基因的潜在分布进行研究发现：包括皮肤表面的角化细胞、肠道的上皮细胞和正常的骨髓细胞在内，在各种有丝分裂细胞系中均没有检测到survivin基因的表达；survivin具有在肿瘤组织中表达特异性强、表达率高，而在正常组织中不表达的特点以及在肿瘤的发生、发展及抗药性等诸多方面所扮演的重要角色而使它很有可能成为肿瘤基因治疗理想的新靶点。

肿瘤的难治还在于肿瘤的天然耐药以及后期治疗时产生的耐受。肿瘤本身高表达survivin能保护化疗药和放射线对肿瘤的杀伤：相反，不足量的化疗药或放射线也能诱导survivin的表达，产生对治疗的继发耐受。研究表明，survivin能抑制某些化疗药物、IL-3，TNF-a，X射线诱导的Fas，Caspase，Bax等参与的凋亡信号通路(Cancer Res，1998，58(23)：5315-5320；J CancerRes，2000，91(11)：1204-1209)。但假如其唯一的BIR区发生C84A的突变，survivin也就丧失对抗化疗药物Taxol诱导的凋亡的抵抗作用。

血管形成过程取决于血管内皮细胞生存和凋亡的平衡。正常情况下，血管内皮细胞中很难检测到survivin。在血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)的刺激下，静止的血管内皮表达survivin的能力约可增强4倍，VEGF的许多抗凋亡活性都是通过诱导内皮细胞表达survivin来实现的(Am J Pathol，2001，158(5)：1757-1765)。血管生成素一l(angiopoietin-1，Ang-1)是胚胎血管形成过程中维持血管稳定性和管腔形成的关键因子。它没有促进内皮细胞生长，而只促进了血管网的稳定和分枝血管的形成。研究发现，Ang-1可以促进内皮细胞中survivin表达，通过Akt(或蛋白激酶B)途径激活survivin的抗凋亡活性，从而阻止内皮细胞凋亡，在体内血管形成过程中稳定血管结构(J Biol Chem，2000，275(3)：9102-9105)。新血管生成是肿瘤生长和转移的必要因素，因此抑制survivin的表达可能对防止肿瘤细胞的浸润、迁移起重要作用。已有多项动物实验证明，反义survivin RNA或survivin突变体可以有效抑制实体瘤的血管形成和肿瘤的侵袭增殖。因此，survivin基因可以作为肿瘤治疗的新靶点。