[发明专利]一种产甘露聚糖酶的工程菌株

说明书

技术领域

本发明涉及一种产酶工程菌株。

背景技术

甘露聚糖酶是一种半纤维素酶，可以水解甘露聚糖、葡萄甘露聚糖、半乳甘露聚糖和半乳葡萄甘露聚糖等植物多糖，并且具有降低人体胆固醇水平、减轻便泌、降低血糖、增加肠内有益菌和减少有害菌的生理功能；所以被广泛的应用于食品、保健和医药、饲料、造纸、洗涤、石油压裂液破胶和纺织等领域，具有广泛的应用空间。采用微生物发酵是目前获得甘露聚糖酶最为理想的途径。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于微生物发酵的产甘露聚糖酶的工程菌株。

产甘露聚糖酶的工程菌株地衣芽孢杆菌HDDMM02(Bacillus licheniformisHDDMM02)属于芽孢杆菌属(Bacillus)，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2008年6月2日，保藏号为CCTCC No：M 208081；地衣芽孢杆菌HDDMM02为革兰氏阳性菌，菌株个体呈直杆状，长为1.2～3.0μm，宽为0.8～1.0μm，常以成对或链状排列，具圆端；地衣芽孢杆菌HDDMM02菌落呈圆形，乳白色，隆起，边缘整齐，无光泽表面有皱褶，不透明，挑起呈粘水状。

本发明地衣芽孢杆菌HDDMM02每一个细胞产一个芽孢，芽孢呈椭圆或卵圆。本发明地衣芽孢杆菌HDDMM02D-木糖发酵为阴性、山梨醇发酵为阳性、乳糖发酵为阳性、棉子糖发酵为阳性、海藻糖发酵为阳性、葡萄糖发酵为阳性、甘露醇发酵为阳性、L-阿拉伯糖发酵为阳性、柠檬酸盐利用试验为阳性、甲基红试验为阴性、V-P试验为阳性、硝酸盐还原试验为阳性、亚硝酸盐还原试验为阳性、淀粉水解试验为阳性、丙二酸试验为阳性、明胶液化试验为阳性、生长温度55℃试验为阴性、质量浓度2％的NaCl耐盐性试验为阳性、质量浓度3％的NaCl耐盐性试验为阳性、质量浓度7％的NaCl耐盐性试验为阳性、质量浓度10％的NaCl耐盐性试验为阳性。

采用现有地衣芽孢杆菌液体培养基及发酵条件都可以对本发明地衣芽孢杆菌HDDMM02进行发酵。采用“地衣芽孢杆菌TS-01液体培养的研究”中使用的液体培养基及发酵条件发酵本发明地衣芽孢杆菌HDDMM02，发酵液中地衣芽孢杆菌HDDMM02菌数浓度为1×10⁷～1×10⁸cfu/mL时发酵液中甘露聚糖酶的酶活力达300000IU/mL以上。

本发明产甘露聚糖酶的工程菌株HDDMM02(Bacillus licheniformisHDDMM02)为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)属于芽孢杆菌属(Bacillus)，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2008年6月2日，保藏号为CCTCC No：M 208081。

附图说明

图1是具体实施方式一地衣芽孢杆菌HDDMM02菌株形态图(100倍放大图)，图2是具体实施方式一地衣芽孢杆菌HDDMM02及其相近菌株的16SrDNA基因序列所构建的系统发育树。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一：本实施方式产甘露聚糖酶的工程菌株地衣芽孢杆菌HDDMM02(Bacillus licheniformis HDDMM02)属于芽孢杆菌属(Bacillus)，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2008年6月2日，保藏号为CCTCC No：M 208081；地衣芽孢杆菌HDDMM02为革兰氏阳性菌，菌株个体呈直杆状，长为1.2～3.0μm，宽为0.8～1.0μm，常以成对或链状排列，具圆端；地衣芽孢杆菌HDDMM02菌落呈圆形，乳白色，隆起，边缘整齐，无光泽表面有皱褶，不透明，挑起呈粘水状。

本实施方式地衣芽孢杆菌HDDMM02每一个细胞产一个芽孢，芽孢呈椭圆或卵圆。本实施方式地衣芽孢杆菌HDDMM02菌株形态如图1所示。

本实施方式地衣芽孢杆菌HDDMM02D-木糖发酵为阴性、山梨醇发酵为阳性、乳糖发酵为阳性、棉子糖发酵为阳性、海藻糖发酵为阳性、葡萄糖发酵为阳性、甘露醇发酵为阳性、L-阿拉伯糖发酵为阳性、柠檬酸盐利用试验为阳性、甲基红试验为阴性、V-P试验为阳性、硝酸盐还原试验为阳性、亚硝酸盐还原试验为阳性、淀粉水解试验为阳性、丙二酸试验为阳性、明胶液化试验为阳性、生长温度55℃试验为阴性、质量浓度2％的NaCl耐盐性试验为阳性、质量浓度3％的NaCl耐盐性试验为阳性、质量浓度7％的NaCl耐盐性试验为阳性、质量浓度10％的NaCl耐盐性试验为阳性。