[发明专利]一种微生物纤维素的制备方法无效
申请号: | 200810137097.5 | 申请日: | 2008-09-11 |
公开(公告)号: | CN101358221A | 公开(公告)日: | 2009-02-04 |
发明(设计)人: | 陈成;张超;吕伟民;吴镝;常洪娟;李娜;安晓光 | 申请(专利权)人: | 黑龙江省轻工科学研究院 |
主分类号: | C12P19/04 | 分类号: | C12P19/04;C12R1/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 150010黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 微生物 纤维素 制备 方法 | ||
1.一种微生物纤维素的制备方法,其特征是:
本发明提供了一种微生物纤维素的制备方法。首先配制发酵培养基:玉米水解糖5%硫酸铵0.5%NaCl0.5%,硫酸镁0.2%,醋酸0.1%;乳酸盐0.15%;110-150℃灭菌10-30分钟,冷却至30℃,接种4%MC-5木醋杆菌种子液,摇床培养120小时,然后将发酵液在高速离心机中以3000r/min的速度高速离心20min后倒掉上清液,取离心沉淀物用4%NaOH溶液在100℃沸水浴中加热30min去除菌体蛋白,再离心取沉淀,加入适量中性洗涤液在100℃的水浴中加热1h以除去沉淀物质中的杂糖和脂类等杂质,然后用去离子水和0.5%乙酸反复冲洗,最后80℃烘干24h,制得细菌纤维素。
2.根据权利要求1所述的一种微生物纤维素的制备方法,其特征是:
以木醋杆菌为出发菌株,首先将木醋杆菌制成菌悬液,采用15W紫外灯,距离30cm,照射20秒,边搅拌边照射,力求使菌体均匀吸收紫外线光波,以上照射过程在暗室中进行,以免光修复。将经过紫外线诱变后的菌体转入到无菌试管中,并立即浸入冰水中1h,在低温条件下,细胞内参与对突变体修复的各种酶类活性受到抑制,使修复难以进行,有利于提高突变率。采用夹层法于30℃恒温箱中培养48h,涂布平板,从培养至对数生长期的平板上随机挑取50个单菌落接种到装有富集培养基的试管中,在30℃培养5d后,挑取10支长膜较好的试管中的菌体用摇瓶进行复筛。将10支试管中的菌株分别接种到盛有20mL发酵培养基的500mL三角瓶中,在30℃下培养5d,提取产物,干燥称重,选取产物干重最高者作为驯化菌株,命名为木醋杆菌MC-5,作为生产菌。
3.根据权利要求1所述的一种微生物纤维素的制备方法,其特征是:
木醋杆菌MC-5培养基为:玉米水解糖2%酵母膏0.5%蛋白胨0.5%,NaCl0.5%,110-150℃灭菌10-30分钟,冷却后接种MC-5木醋杆菌驯化菌株,通风培养14小时,制备种子液。
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