[发明专利]一种桦褐孔菌多糖的提取分离方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种药用真菌桦褐孔菌多糖的提取方法，特别的使用超声波对 桦褐孔菌细胞进行破碎处理，使用热水浸提、冰冻乙醇沉淀、硫酸铵盐析、半 透膜透析、喷雾干燥等工艺最终获得纯度较高的桦褐孔菌多糖。

背景技术

桦褐孔菌[Inonotus obliguus(Fr)Pilat]在俄罗斯、波兰、芬兰等地是 一种应用很广泛的要用真菌，英文名chaga。1955年，chaga被俄罗斯医学研究 院用来治疗肿瘤，特别是消化系统和肺部肿瘤。16世纪至今，东欧一些国家的 民间就用这种菌的菌核来防治癌症。西部利亚的Khanty人用这种真菌来预防和 治疗心脏病、肝病、胃病和食道疾病等。近期研究表明，桦褐孔菌能抑制艾滋 病病毒(HIV-1)，抗辐射、并通过抑制蛋白质生物合成、抗有丝分裂及消除自 由基活性等作用机制来抑制或延缓肿瘤细胞的生长和防治0-157大肠杆菌中毒。

桦褐孔菌的使用主要以野生为主，野生的桦褐孔菌主要生长在俄罗斯的西 伯利亚地区、日本北海道、芬兰、等地。在我国吉林长白山地区和黑龙江张广 才岭和大、小兴安岭地区有野生桦褐孔菌生长。

生物学研究表明，桦褐孔菌在野生状态下生长极为缓慢，野生的品种只有 在活的桦树上生长10～15年才具有很高的药用价值，因此野生的桦褐孔菌价格 十分昂贵。美国也把它列为“特殊天然物”作为宇宙人的未来饮品。因此，桦 褐孔菌的研究及产品的开发具有十分广阔的应用前景。

真菌多糖是一类很好的免疫调节增强剂，可从根本上提高人体的免疫功能， 起到扶正固本、强身保健的作用。20世纪80年代以来，这方面的研究利用进展 更为迅速且正朝着抗癌、增寿、强力、益智、美容以及提高免疫力和防止衰老 等方面深化。现代医学研究发现，食(药)用菌中能显著增强癌症患者抵抗力 的成分即为多糖。

桦褐孔菌多糖除具有真菌多糖共有的生理功能外，其独有的生理功能也备 受关注，由其在抗癌和抑制艾滋病病毒方面具有独特的功效。有报道，桦褐孔 菌多糖对艾滋病病毒的抑制率可达到80％以上。目前对于桦褐孔菌多糖的提取鲜 有报道。本发明的内容首次系统的将有超声波破壁法与热水浸提、冰冻乙醇沉 淀、硫酸铵盐析、半透膜透析、喷雾干燥等提取分离方式相结合进行桦褐孔菌 多糖的提取，最大限度的保证了桦褐孔菌多糖的提取量和生理活性。

发明内容

本发明的目的在于，在桦褐孔菌的提取过程中使用超声波对桦褐孔菌提取 液中的桦褐孔菌进行细胞的破壁处理，使用热水浸提、冰冻乙醇沉淀、硫酸铵 盐析、半透膜透析、喷雾干燥等工艺进行桦褐孔菌多糖的提取与分离最终获得 纯度较高的桦褐孔菌多糖。该方法提取的多糖的含量、生理活性均较高，是目 前桦褐孔菌的最佳提取方法。

本发明多糖的提取是这样实现的：

1.取生长期在10年以上的桦褐孔菌清洗除去表面灰尘杂质，30～55℃烘干， 粉碎，过20～80目筛子，向粉碎过筛后的桦褐孔菌中加入5～30倍重量的水， 浸泡1～3小时后使用10～30KH的超声波处理30～60min。

2.将1处理过的桦褐孔菌加热保持水温80～100℃持续提取3～6小时后过 滤，取滤液。继续向滤渣中加入5～10倍量的水，保持80～100℃持续提取2～ 4小时，过滤，取滤液。滤渣中加入3～8倍量的水，80～100℃持续提取1～3 小时，过滤。弃滤渣，将三次提取获得的滤液混合，过超滤膜，蒸发浓缩至原 体积的1/7～1/5。

3.取提取液0.5～2倍体积的无水乙醇在-20～-5℃冰冻处理3～5小时，获 得冰冻乙醇。将冰冻乙醇加入2中沉淀10～20小时获得桦褐孔菌粗多糖沉淀。

4.过滤3将沉淀的粗多糖与滤液分离，并回流回收除去滤液中的乙醇。向 滤液中加入硫酸铵进行盐析，获得沉淀多糖。

5.将3、4获得的粗多糖混合，溶解于蒸馏水中，经半透膜透析除去多糖中 的离子杂质。

6.将5透析获得的溶液浓缩后，喷雾干燥得桦褐孔菌多糖。

本发明的优点是

本发明实现了在较小能耗、较少有机溶剂使用的情况下，桦褐孔菌多糖的 提取。采用超声波对原料进行细胞破壁处理，使其细胞破壁细胞内多糖成分能 够在提取的过程中被提取出来增大了多糖的提取率，采用冰冻乙醇沉淀与盐析 沉淀结合的方式进行桦褐孔菌多糖的分离避免了金属离子和杂质蛋白质混入桦 褐孔菌多糖中。该发明桦褐孔菌多糖的提取方法具有很强的应用性，是目前桦 褐孔菌多糖提取的最优化方法。