[发明专利]一种微生物源抗逆剂的制备方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及一种微生物源抗逆剂的制备方法，属生物工程领域中的生物农药加工技术。

(二)背景技术

化学农药在防治农作物病虫草害等方面发挥着巨大作用，促进了现代农业的发展。化学农药一般具有成本低、操作简便、防治效果好、见效快、防治谱广、性质稳定、便于贮运等优点，近百年来一直是植保领域发展最快、使用最广的农药品种。然而，长期、广泛、大量、连续地使用化学农药，一方面导致有害生物产生抗药性，随着用药量越来越大，形成恶性循环；另一方面，过量地使用化学农药，对农业生态平衡造成严重破坏，使土壤恶化、农副产品及畜产品农药残留量严重超标，不仅危害人类身体健康，而且也造成了很大的经济损失。人类的一切活动都是为其健康生存服务的，一切不利于人类健康存在的事物当在淘汰之列。在化学合成农药因公害而发展前途受到怀疑的同时，生物源农药则由于对目标生物的专一性，对非目标生物的安全无污染的特点，将代替化学合成农药成为未来农药发展的方向和主导。

本发明的生物抗逆剂是由微生物的细胞壁和内溶物经酶解后形成的一种营养性生物制剂，具有无污染环境、零排放、无残留的特点。用此系列生物抗逆剂浸种处理作物种子，可以明显的促进作物种子的萌发，调控作物幼苗的生长，提高作物幼苗的抗逆性。

(三)发明内容

本发明目的在于提供一种微生物源抗逆剂的制备方法。

本发明的目的是这样实现的：本发明中所涉及的比例除另有注明之外为质量比，本发明的产品采用这样的方法来制备的：

1.制备过程

1.1 原料来源

柠檬酸发酵厂家的废弃产物——黑曲霉菌体。

1.2 制备方法

1.2.2 菌丝体细胞壁内溶物酶解液的制备

将黑曲霉菌体按1：5的比例加水，经DSH150型号高剪切胶体磨(启东市东盛化工机械厂生产)粉碎匀浆后，使黑曲霉菌丝体破碎，破碎组织小于5μm，将黑曲霉菌体匀浆液加热至55℃，添加1％纤维素酶(2万单位/克)、1％果胶酶(2万单位/克)、2％β-葡聚糖酶(3万单位/克)、2％酸性蛋白酶(5万单位/克)，充分混匀后55℃保温水解6小时，然后升温至100℃，保持10分钟灭酶，冷却后经管式离心机在15000转/分钟的转速下高速离心，取离心上清液待用，将离心分离得到的菌丝体渣作为有机肥料，应用于农业种植。

1.2.3 微生物源抗逆剂的制备

按重量比为上清液：低聚木糖：壳寡糖：黄腐酸＝(50—60)：(2—3)：(1-2)：(3-5)的比例充分混匀，使上清液中的添加物质完全溶解，经142℃3秒超高温瞬时灭菌后进行无菌灌装，制成成品。

2.应用效果

下面通过具体实验来证明本发明专利的应用效果

2.1 试验材料与方法

2.1.1 供试作物

玉米(东农248)

小麦(龙辐00-4379)

2.2.2 实验方法

试验在东北农业大学农药与杂草研究室进行，设生物抗逆剂2.5ml/L、5ml/L、10ml/L、20ml/L4种浓度处理，另设清水对照。挑选大小均一、健康饱满的玉米、小麦种子，浸于系列浓度的生物抗逆剂中，置25℃恒温光照培养箱中浸种12h，每处理4次重复，每重复50粒种子。每天记录发芽数，第3d和第7d统计发芽势和发芽率，并计算发芽指数和活力指数。发芽指数：GI＝∑(Gt/Dt)，Gt指在时间为t日内的发芽数，Dt为相应的发芽日数；活力指数：VI＝GI×L，L指幼苗株鲜重。萌发试验第2d，取各处理萌发的种子作玻璃板直立发芽试验，每板10粒种子，4次重复，摆好后放于底部盛水的玻璃器皿中，放入温度为(25±1)℃的恒温光照培养箱中培养，7d后测量幼苗的芽鞘长、根长，并取幼苗根系，测定根系活力、超氧化物岐化酶(SOD)活性和过氧化物酶(POD)活性，两种酶活性提高说明作物抗逆性增强。

2.2 结果与分析

2.2.1 生物抗逆剂对作物种子萌发的影响

2.2.1.1 生物抗逆剂对玉米种子萌发的影响

不同浓度的生物抗逆剂对玉米种子萌发的影响结果见表1

由表1数据可以看出，抗逆剂浓度为2.5ml/L对玉米种子萌发影响不大；而10ml/L和20ml/L两组实验结果表明，高浓度抗逆剂对玉米种子的萌发具有显著的抑制作用，发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数均显著的低于对照组；生物抗逆剂浓度5ml/L时玉米种子的发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数均达到最大，与对照相比达到显著差异。

              表1 生物抗逆剂对玉米种子萌发的影响