[发明专利]一种低分子鼠李聚糖硫酸酯及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种低分子鼠李聚糖硫酸酯及其制备方法和应用。

背景技术

鼠李聚糖硫酸酯是由绿藻细胞壁中提取的硫酸多糖，具有多种生物活性，特别是抗凝血活性。众所周知，多糖的生物活性与其初级结构、高级结构、分子量、溶解度等因素有关，其中，分子量具有重要作用，分子量过大，将直接影响其生物活性。因此，通过有效的方法使多糖的分子量降低，是提高多糖生物活性的一种重要手段，也是研制糖类药物的重要途径。鼠李聚糖硫酸酯的分子量为150000～400000道尔顿，其分子量高，粘度大，水溶性差，使其应用受到限制。而且作为一种强聚阴离子性质的多糖类化合物，鼠李聚糖硫酸酯的分子量大小和溶解性对其生物活性产生重要影响。目前，有关低分子鼠李聚糖硫酸酯未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种低分子鼠李聚糖硫酸酯及其制备方法和应用，它能弥补现有技术的上述不足。

一种低分子鼠李聚糖硫酸酯，其特征在于该低分子鼠李聚糖硫酸酯是由L-鼠李糖基以α-1，3-糖苷键连接的线形分子；硫酸酯基位于L-鼠李糖基的C-2位和/或C-4位，低分子鼠李聚糖硫酸酯中硫酸酯基的取代度为0.4～2；分子量为3000～100000道尔顿，结构式如下所示：

式中n为5～345，R为H或SO₃^-或SO₃M，M为碱金属离子。

上述低分子鼠李聚糖硫酸酯的制备方法，其特征在于将鼠李聚糖硫酸酯配成水溶胶，加入酸或氧化剂，然后加热反应，冷却，加碱中和或加酶终止反应，分离出清液，然后浓缩，脱盐，将脱盐后的清液浓缩，用超滤膜或用凝胶色谱柱分离，将收集的溶液脱盐，浓缩，干燥，粉碎。

上述低分子鼠李聚糖硫酸酯在制备抗凝血药物或抗血栓药物中的应用。

本发明的产品结构独特，溶解性好，粘度低，来源于天然的多糖，具有抗凝血活性和抗血栓活性，对人体无毒副作用，可长期使用。还可以通过添加各种附剂制成片剂、散剂、颗粒剂或胶囊等作为预防和治疗血栓栓塞性疾病的新型抗凝血药物或抗血栓药物，将具有良好的市场应用前景。

具体实施方式

下面通过一些具体的实施例来对本发明作进一步的说明。

实施例1

将鼠李聚糖硫酸酯加水配成重量百分浓度为1％的水溶胶，加入盐酸至水溶胶中的摩尔浓度为0.01mol/L，在60℃下反应120分钟，反应结束后，将反应物用冷水浴冷却至室温，加氢氧化钠中和至中性终止反应，离心弃去杂质，取清液，将所得清液减压浓缩，然后进行透析去除盐，将去除盐后的溶液减压浓缩后，通过截留分子量100000的超滤膜分离，收集超滤膜外液，用透析法去除盐，将去除盐后的溶液减压浓缩后，冷冻干燥，粉碎即得本发明的低分子鼠李聚糖硫酸酯。

实施例2

将鼠李聚糖硫酸酯加水配成重量百分浓度为3％的水溶胶，加入硫酸至水溶胶中的摩尔浓度为0.05mol/L，在40℃下反应180分钟，反应结束后，将反应物用冷水浴冷却至室温，加碳酸氢钠中和至中性终止反应，离心弃去杂质，取清液，将所得清液减压浓缩，然后进行超滤去除盐，将去除盐后的溶液减压浓缩后，通过凝胶色谱柱Sephacryal S-400分离，用0.2mol/L醋酸钠水溶液洗脱，收集洗脱峰的洗脱液，用超滤法去除盐，将去除盐后的溶液减压浓缩后，真空干燥，粉碎即得本发明的低分子鼠李聚糖硫酸酯。

实施例3

将鼠李聚糖硫酸酯加水配成重量百分浓度为0.5％的水溶胶，加入过氧化氢至水溶胶中的重量百分浓度为2.5％，在30℃下反应120分钟，反应结束后，将反应物用冷水浴冷却至室温，加入过氧化氢酶去除过氧化氢终止反应，离心弃去杂质，取清液，将所得清液减压浓缩，然后进行透析去除盐，将去除盐后的溶液减压浓缩后，通过截留分子量80000的超滤膜分离，收集超滤膜外液，用透析法去除盐，将去除盐后的溶液减压浓缩后，烘干，粉碎即得本发明的低分子鼠李聚糖硫酸酯。

实施例4

将鼠李聚糖硫酸酯加水配成重量百分浓度为2％的水溶胶，加入亚硝酸至水溶胶中的重量百分浓度为1.5％，在50℃下反应300分钟，反应结束后，将反应物用冷水浴冷却至室温，加入氢氧化钾中和至中性终止反应，离心弃去杂质，取清液，将所得清液减压浓缩，然后进行超滤去除盐，将去除盐后的溶液减压浓缩后，通过凝胶色谱柱Sephacryal S-200分离，用0.1mol/L醋酸钠水溶液洗脱，收集洗脱峰的洗脱液，用超滤法去除盐，将去除盐后的溶液减压浓缩后，真空干燥，粉碎即得本发明的低分子鼠李聚糖硫酸酯。