[发明专利]一种三疣梭子蟹抗病品系的构建方法有效
| 申请号： | 200810138161.1 | 申请日： | 2008-07-04 |
| 公开（公告）号： | CN101617638A | 公开（公告）日： | 2010-01-06 |
| 发明（设计）人： | 崔朝霞;李喜莲;刘媛;王鸿霞 | 申请（专利权）人： | 中国科学院海洋研究所 |
| 主分类号： | A01K61/00 | 分类号： | A01K61/00;C12N15/12 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 | 代理人： | 许宗富;周秀梅 |
| 地址： | 26607*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 梭子蟹 抗病 品系 构建 方法 | ||
1.一种三疣梭子蟹抗病品系的构建方法，其特征在于：以选育材料的线粒体控制区序列的信息作为分子标记，根据分子标记得到遗传变异丰富的群体作为群体选育的基础群体，同时得到以遗传上相互独立的群体作为家系选育的补充材料；首先将基础群体行群体选育所得群体与家系选育的补充材料进行家系选育，而后将家系选育所得抗病性状稳定的群体之间进行家系间杂交组合，所得抗病性状稳定的家系即为抗病品系，其中每一步骤选育材料均为经感染源浸泡感染后半致死浓度存活的个体；
所述选育材料的线粒体控制区序列的信息作为分子标记为以选育材料的基因组DNA为模板采用引物上游引物序列5’-AGGAATTAAGAAACAATCAAACTTT-3’和下游引物序列5’-GCCGTTGAGTGAAGAGTGTTCAGATAG-3’进行PCR扩增获得线粒体控制区的序列片段，所述选育材料为各地区蟹的群体。
2.按权利要求1三疣梭子蟹抗病品系的构建方法，其特征在于：所述PCR扩增时PCR总反应体积为25ul，其中含10mM dNTP 0.5ul，每个引物5uM1ul，0.4U Taq酶，10×PCR Buffer2.5ul，25mM Mgcl21.5ul；PCR反应程序：95度3min；然后95度30s，55度30s，72度1min，循环29次；最后72度7min。
3.按权利要求1三疣梭子蟹抗病品系的构建方法，其特征在于：所述遗传变异丰富的群体为将各地区蟹的线粒体控制区序列作为分子标记中筛选出的丹东群体、青岛群体、营口群体、连云港群体或宁波群体。
4.按权利要求1三疣梭子蟹抗病品系的构建方法，其特征在于：所述遗传上相互独立的群体为将各地区蟹的线粒体控制区序列作为分子标记中筛选出的莱州湾群体和广西北海群体。
5.按权利要求1三疣梭子蟹抗病品系的构建方法，其特征在于：所述每一步骤选育材料均为经溶藻弧菌72小时半致死浓度浸泡感染后的剩余个体。
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