[发明专利]一种生物碱化合物及其制备方法与作为酶抑制剂的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种具有新颖哑嗪环结构的生物碱类化合物，特别是涉及一类具有酶抑制活性的生物碱化合物及其制备方法与应用。

背景技术

自从1929年从真菌中制备出青霉素以来，真菌的代谢产物成为了药物的丰富来源，绝大多数临床应用的抗生素都来源于真菌和细菌。真菌的代谢产物还有其他的药用价值，如抗肿瘤，治疗心血管疾病，酶抑制剂等。由于海洋环境的特殊性，海洋真菌能提供陆生真菌无法提供的代谢产物，但目前尚未见到由海洋真菌获得有药用价值的酶抑制剂产品。

发明内容

本发明的目的在于提供一种来源于海洋真菌的生物碱化合物及其制备方法与作为酶抑制剂的应用，它能满足现有技术的上述需求。

一种生物碱化合物，其特征在于它的结构式为

式中R₁为溴离子、R₂为；或R₁为氢离子、R₂为或或

上述生物碱化合物的制备方法，其特征在于先在培养基中对海洋真菌进行菌种培养，再在发酵培养基中对真菌进行发酵培养，然后将所得发酵液过滤，除去菌体，将滤液加热浓缩，用乙酸乙酯萃取；萃取液浓缩后进行色谱分离，将所得洗脱液浓缩，得无色结晶，即为penicillazine；在溶有Penicillazine的溶液中，加入溴或二氧化锰，反应后分别得到Penicillazines 1和2；或者在溶有Penicillazine 2的溶液中，加入醋酸酐，反应后得到Penicillazines 3和4。

上述的生物碱化合物在制备酶抑制剂药物中的应用。

本发明从海洋真菌中获得了一个新的生物碱，并且对该化合物进行了化学修饰，具有酶抑制活性，能有效地抑制人拓扑异构酶I，可用于开发酶抑制剂药物，并且原料可以进行大规模生产，不受资源限制，因此应用前景广阔。

具体实施方式

本发明的化合物的制备

(1)真菌Penicillium sp.386的菌种培养所用的培养基含有葡萄糖1.0％(重量百分比，下同)、酵母膏0.1％、蛋白胨0.2％、琼脂1.0％、氯化钠0.3％，其余为水，使用时制成试管斜面，真菌菌株在30℃下培养5天。

所述的菌种培养基含有葡萄糖0.1％-5.0％(重量百分比，下同)、酵母膏0.01％-1％、蛋白胨0.01％-1％、琼脂0.1％-3.0％、氯化钠0.05％-5％，其余为水。(2)真菌Penicillium sp.386的发酵培养所用的发酵培养基含有葡萄糖1.0％(重量百分比，下同)、酵母膏0.1％、蛋白胨0.2％、氯化钠0.3％，其余为水，真菌菌株于28℃培养30天。

所述的发酵培养基含有葡萄糖0.1％-5.0％(重量百分比，下同)、酵母膏0.01％-1％、蛋白胨0.01％-1％、氯化钠0.05％-5％，其余为水。

(3)化合物penicillazine的分离提取

将所得发酵液过滤，除去菌体；加热浓缩后，用乙酸乙酯萃取5次，将所得萃取液浓缩后，进行层析分离，洗脱液浓缩得无色结晶，即为penicillazine。

(4)Penicillazine 1的制备

称取上述干燥后的Penicillazine(0.1mol)溶解在冰醋酸中，冰浴条件下，在充分搅拌下将溴(0.2mol)逐滴滴加到反应溶液中，反应1小时后，向反应物中加入蒸馏水(200mL)来终止反应，用乙酸乙酯(500mL)进行萃取，将萃取液浓缩后，进行柱层析，用乙酸乙酯洗脱，洗脱液浓缩，重结晶后得到化合物Penicillazine 1。

(5)Penicillazine 2的制备

称取干燥后的上述Penicillazine(0.1mol)溶解在干燥的丙酮(50mL)中，然后向其中加入新制的固体二氧化锰(100g)作为氧化剂，室温条件搅拌反应24小时后，用TLC检测，原料消耗完全后，将反应液过滤，滤出的固体氧化剂用丙酮充分洗涤，将过滤液与洗涤液合并，减压浓缩后，进行柱层析，用乙酸乙酯与石油醚两者体积比为0.5的洗脱液进行洗脱，将洗脱液浓缩后，重结晶得到化合物Penicillazine 2。

(6)Penicillazines 3和4的制备