[发明专利]血细胞分析用无氰白细胞三分群环保型溶血素

说明书

技术领域

本发明涉及一种血细胞分析用的溶血素，具体涉及一种用于血细胞分析用无氰白细胞三分群环保型溶血素。

背景技术

白细胞分类计数和血红蛋白浓度的测定是医学诊断中分析人体血液的重要指标。血液中的白细胞有五种类型：淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞，后三者统称为粒细胞，因此，将白细胞分为三个亚群即为：淋巴细胞、单核细胞、粒细胞。

溶血素是测试血红蛋白含量(Hb)和白细胞计数(WBC)或白细胞分类的关键试剂，属临床检验最常用的试剂之一，与稀释液等配套应用于血细胞分析仪。

测定血红蛋白浓度和白细胞分类计数均需要稀释血液样本，并且需要特异的溶血素，一方面，溶血素使红细胞(RBC)迅速溶解，释放出血红蛋白与溶血素结合形成稳定的血红蛋白衍生物，这种衍生物在特定波长下有最大吸收峰，通过测定其吸光度，乘以其摩尔浓度从而计算出血液样本中的血红蛋白的含量；同时溶解红细胞，进行白细胞计数，以免干扰白细胞的检测(因为血液中的红细胞数量远远多于白细胞数量)。另一方面，为了保证白细胞三个亚群的检测，白细胞的体积也需要一定程度的改变，此时的白细胞膜需要一定程度的溶解，以便释放出胞浆，同时维持细胞核的完整状态，保持一定体积以便进行分群测定。

1996年，国际血液学标准化委员会(International Council for Standardizationin Hematology，ICSH)推荐氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法作为国际血红蛋白测定标准方法，其主要特征为：在波峰λ＝540nm，波谷λ＝504nm时，具有明显的波峰、波谷，该法虽然能够较精确地测量Hb，但其最大的缺点就是，使用的氰化物有剧毒，对使用者的人体健康和环境构成威胁。

专利号为00106117.8的文献公开了一种无氰溶血素，该溶血素由十六烷基三甲基溴化铵、聚乙二醇辛基苯基醚、医用级乙醇组成。

专利号为03140211.9的文献公开了一种无氰化物溶血素及其使用方法，该溶血素包括一种阳离子表面活性剂、一种阴离子表面活性剂、一种非离子表面活性剂。

专利号为200610078645.2的文献公开了一种用于血细胞分析仪的无氰溶血素及其制备方法，其组成为：季铵盐、咪唑、碱金属氯化盐、水。

专利号为200610012725.8的文献公开了一种环保无氰溶血剂，该溶血素由缓冲液与贮存液混合而成，其中缓冲液各组分配比为：磷酸氢二钾15.63g/L、柠檬酸3.78g/L、水为余量；贮存液各组分配比为十二烷基三甲基氯化铵100.00g/L，磷酸氢二钠15.63g/L、柠檬酸3.78g/L，水为余量。

上述专利适用于测定Hb而不能同时准确进行白细胞三分群。本发明既能与国际血液学标准化委员会(International Council for Standardization in Hematology，ICSH)推荐的氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法高度相关，又能准确、快速的进行白细胞三分群。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术不足，提供一种既能与国际血液学标准化委员会(International Council for Standardization in Hematology，ICSH)推荐氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法高度相关，又能准确、快速的进行白细胞三分群的血细胞分析用无氰白细胞三分群环保型溶血素。

为达到以上目的，本发明的技术方案为：

血细胞分析用无氰白细胞三分群环保型溶血素，包括以下组分：

1、月桂基硫酸钠(SLS)，其含量范围是0.5～5.0g/l。作为血细胞分析用无氰白细胞三分群环保型溶血素的成分之一，其原理是，血液中各种Hb均可与低浓度SLS作用，生成SLS-Hb棕红色化合物，其吸收曲线波峰在538nm。使用月桂基硫酸钠(SLS)测定血红蛋白浓度的优点是操作简单，呈色稳定，准确性和精确性符合要求，并且SLS本身环保、无公害。使用月桂基硫酸钠(SLS)作为溶血素的成分之一，必须掌握好其浓度，高浓度的月桂基硫酸钠(SLS)对白细胞的破坏过大。

进一步，所述的月桂基硫酸钠(SLS)，优选浓度范围为：1.0～2.0g/L。

2、季铵盐，表面活性剂含量范围是3.0～10.0g/L。进一步，季铵盐优选C₁₂～C₁₈长链烷基季铵盐。季铵盐的作用是溶解红细胞，便于释放出血红蛋白(Hb)与SLS结合，同时溶解掉红细胞以利于白细胞计数。