[发明专利]用甲醇萃取法提取莫能霉素钠的方法

说明书

技术领域

用甲醇萃取法提取莫能霉素钠的方法，属于生物制药与工程领域。主要用于用发酵 法生产的莫能霉素纯品(钠盐形式)的生产。

背景技术

莫能霉素属于聚醚类离子载体抗生素，亦称莫能菌素、肉桂霉素，是肉桂地链霉菌 (Streptomyces cinnamonensis)产生的具有五环多醚结构的酸性抗生素，1967年发 现有抗球虫作用，1971年在美国作为抗球虫剂批准生产上市，1984年又批准用作牛、 羊的生长促进剂，在40多个国家和地区得到推广和应用，是70年代以来发展最快的一 类畜禽专用抗生素，年使用量近三万吨，在防止球虫感染和提高反刍动物饲料转换率上 取得了显著的经济效益，使用量逐年上升。聚醚类抗生素主要对革兰氏阳性菌有较高的 抗菌活性，有的对某些真菌也有抗菌作用，但对革兰氏阴性菌作用很弱。对畜禽球虫具 有广谱的活性。不仅对鸡的6种艾美耳球虫病有控制和预防效果，对犊牛、羔羊、仔猪、 子兔等的球虫均有较高的活性，且耐药性发展缓慢。主要作用于球虫生活史早期(子胞 子至第一代裂殖体)，聚醚类抗生素对反刍动物有明显的改进饲料效率的作用。目前， 我国的畜牧养殖业正在向规模化、集约化发展，尤其是肉牛的养殖规模在不断扩大，必 将进一步扩大莫能霉素的用量。

莫能霉素的主要生产厂家为美国礼来大药厂，其年产量约为2万吨，年销售额为 1.72亿美元。中国近几年开始引进莫能霉素的生产技术和工艺，逐步形成了规模，但市 场上均以莫能霉素预混剂的形式出现，没有莫能霉素钠产品生产和销售。莫能霉素在酸 性含水环境中易失活，碱性条件下很稳定，其干燥结晶能长期保存稳定，在饲料中的稳 定性也好。

国内企业目前没有莫能霉素钠纯品的批量生产，市场上几乎都是莫能霉素预混剂产 品。研究一种产品萃取率高、成本低、产品质量好的莫能霉素钠纯品非常必要。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：克服现有技术存在的问题，提供一种产品萃取率高、 成本低、产品质量好的用甲醇萃取法提取莫能霉素钠的方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：该用甲醇萃取法提取莫能霉素钠的方 法，包括砂土管菌种、斜面菌种、一级种子培养液、二级种子培养液、发酵液、滤饼、 溶解释放、萃取、脱色，其特征在于：萃取采用含湿量为20％-30％的菌丝体，按重量比 加入5-8倍的浓度为60-90％的甲醇，控制温度15-35℃，搅拌30-40分钟使充分溶解， 再经活性炭脱色、过滤、结晶、分离、干燥、包装、制成成品；

具体工艺方法如下：

(1)斜面菌种培养：挑取少量砂土管孢子接种于灭菌后的斜面培养基上，32℃培 养240小时，然后在1-6℃冰箱里保存；

(2)一级种子和二级种子培养：将培养好的斜面菌种2支在无菌保护下接种于灭 菌的500L一级种子培养基中，35℃培养26小时，然后通过蒸汽灭菌的无菌管道移入灭 菌后的2000L二级种子培养基中，35℃培养24小时；

(3)发酵培养：将二级种子培养液通过蒸汽灭菌的无菌管道移入灭菌后的25000L 发酵培养基中，温度控制在35℃、PH控制在6.4-6.8，培养325小时；

(4)发酵液过滤分离：将发酵液用固体氢氧化钠调节PH至9.2，然后用板框进行 固液分离、吹风，得到水分含量20-30％的菌丝体滤饼；

(5)溶解：称取200公斤水分含量为25％的滤饼，在搅拌下慢慢加入已放入1200L 浓度为80％甲醇的溶解罐中，甲醇温度控制在25℃，搅拌30分钟，让滤饼里的莫能霉 素充分释放到甲醇中，停搅拌，静置15分钟；

(6)脱色：在脱色罐中加入6公斤针用活性炭，吸附脱色30分钟，然后过滤，得 到脱色液1160L，脱色液收集到不锈钢结晶罐中；

(7)结晶、分离：开启结晶罐搅拌，慢慢加入纯化水2500L，莫能霉素会慢慢以 晶体形态析出，纯化水加完后继续搅拌60分钟，用烧杯取样观察结晶情况，确认已结 晶完全，然后将结晶液用离心机进行分离，离心30分钟，得到莫能霉素湿晶体66公斤。

(8)干燥、包装：将莫能霉素湿晶体吸入双锥干燥机中，真空度控制在-0.07至 -0.09MPa，温度85-95℃，干燥4.5小时，得到成品62.1公斤。