[发明专利]利用海参加工废液提取海参多糖的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用海参加工废液提取海参多糖的工艺方法。

背景技术

海参多糖具有重要的生物学活性，如增强免疫力、抗肿瘤、抗病毒、抗凝血、抑制细菌感染、降低血黏度、促纤维蛋白溶解、保护神经组织等作用。海参多糖的硫酸酯基含量非常高，超过了传统补益类中药阿胶、鹿角胶、龟板胶、鳖甲胶等多糖分子中硫酸酯基的含量，这在动物类食品资源中极为罕见，因而海参多糖作为一种“富聚阴离子”产品，在保健、医疗等方面具很高的应用价值。

目前提取海参多糖的工艺、方法有多种。

如1999年，广东省药物研究所在《中药材》第22卷，发表了“玉足海参多糖的分离及理化性质”，其主要特点是：将海参体壁用氢氧化钾消化后用盐酸中和，离心，清液加入硅藻土，十六烷基三甲基溴化氨和氯化钠搅拌，取沉淀用硫氢化钾解离，酒沉，双氧水脱色，醋酸钾沉淀制得。

2000年，湖南九芝堂股份有限公司，在《湖南中医杂志》第16卷，发表了“海参多糖提取工艺研究”，其主要工艺流程是干品海参→水煮发涨→去尽泥砂内脏→捣碎、匀浆→50℃水浴搅拌数小时，至稀稠状→海参匀浆液→调PH2.0～2.5→酸性匀浆液→加胃蛋白酶(50℃水浴)→酶解→胃酶酶解液→调PH8.0～9.0→加胰蛋白酶(50℃水浴)→酶解→胰酶酶解液→煮沸→离心分别为沉淀物和红棕色离心溶液(I)→pH6.8～7.2→缓缓加入95％乙醇至含醇量达60％→静置过夜→离心→分别为离心液(II)和沉淀(海参多糖粗品)。

2003年，南京中医药大学，在《中国海洋药物》第1期，发表了“糙海参多糖纯化工艺优选及其产物的药理活性比较研究”，其具体操作为糙海参干颗粒投入5倍量5％氢氧化钾溶液中浸泡24h，于30～40℃搅拌至溶。以冰醋酸调中性，冷却使沉淀完全，2000r/min离心15min。上清液以2倍体积95％乙醇沉淀，2000r/min离心15min，沉淀加5倍体积水溶解，得糙海参粗多糖溶液。

2007年，华南理工大学轻工与食品学院，在《现代食品科技》第23卷，发表了“糙海参酸性粘多糖的提取纯化工艺探讨”，其主要特点将冷冻的糙海参解冻，加入3倍体积的水，匀浆，用1mol/L NaOH和1mol/LCH3COOH调节pH值，加入木瓜蛋白酶，放置于恒温水浴槽中，进行酶解，酶解时用NaOH和CH3COOH调pH值使其稳定。取出海参消化液，加热至80～90℃灭酶活，3000r/min离心10min，弃去下层不溶物，取上清液；然后在上清液加入2倍体积的无水乙醇，冰箱中静置过夜，取出，3000r/min离心10min，取沉淀，先后以丙酮、乙醇洗脱，真空冷冻干燥得粗多糖。

2007年，莱阳农学院，在《精细化工》第24卷，发表了“长岛刺参的提取精制及基本性质”，其特征是鲜刺参捣碎，酶解，杀酶，离心，上清液真空浓缩，浓缩液醇沉，沉淀冻干。以上方法均采用干参或鲜参提取制备海参多糖，海参本身价格比较昂贵，因此利用干参或鲜参提取多糖，其成本更高，难于产业化推广。

中国专利200610146202.2公开了一种利用海参煮汁提取海参多糖等多种活性成分的方法，其工艺过程是将海参煮汁进行复合酶酶解、乙醇纯化、离心分离、过滤、浓缩、冷冻干燥等工艺，该专利所公布的工艺设备投入较大，其中用到过滤及纳滤，此工艺会经常堵塞设备，且所得海参多糖组分不单一，杂质含量高，还含有多肽、海参毒素等物质，纯度不高。

发明内容

本发明针对现有技术的不足提出一种利用海参废液提取海参多糖的方法。

本发明的技术方案包括如下步骤：

(1)、将海参加工废液第一次减压浓缩后醇沉，然后离心去除杂质，收集第一上清液经第二次减压浓缩后得到浓缩液；

(2)、所得浓缩液通过大孔吸附树脂柱以去除海参皂苷得到第一滤过液；

(3)、将第一滤过液醇沉后离心收集沉淀，沉淀加入纯净水复溶，不溶部分离心去除得第二上清液；第二上清液通过阳离子交换柱和阴离子交换柱去除盐分，得到第二滤过液；

(4)、第二滤过液干燥得海参多糖干品。

本发明具体步骤如下：

1、收集海参加工废液利用减压浓缩设备，在60～80℃下进行第一次减压浓缩，浓缩至固形物含量在10％-15％之间；加入95％的乙醇进行沉淀，使其终浓度为20％-25％；对醇沉后的溶液进行离心，离心转速≥2000r/min，收集第一上清液；对第一上清液进行第二次减压浓缩，使固形物含量达到10％-15％得到浓缩液。

2、将浓缩液通过AB-8或D101或NKA型大孔吸附树脂柱，收集得到第一滤过液；