[发明专利]检测一种或多种猪病毒性腹泻疾病抗体的试纸条

说明书

(一)、技术领域：本发明涉及一种检测猪病毒性传染病抗体的器具，特别是涉及一种检测一种或多种猪病毒性腹泻疾病抗体的试纸条。 

(二)、背景技术：猪腹泻性疾病是一类严重影响养猪业发展的疾病，其中的病毒性腹泻尤其难以防治。猪流行性腹泻病毒(PEDV，代号P)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV，代号T)和轮状病毒(RV，代号R)是引起猪病毒性腹泻的主要病毒，这三种病毒引起的猪腹泻性疾病，其临床症状相似，而且往往在同一个猪场混合感染的情况比较多。因此，为了及时预防和治疗猪病毒性腹泻，需要快速鉴别诊断猪病毒性腹泻的特异方法，即需要快速检测相关病毒或其特异抗体。目前，实验室检测这3种病毒抗体的方法有：(1)在细胞系上培养相应阳性病毒，以检测血清样品中的相应病毒抗体；(2)用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清样品中的相应病毒抗体。以培养病毒来检测抗体，需要实验室条件、高级专业人员和比较昂贵的仪器设备，操作繁琐，检测费时、费力；ELISA需要酶标仪、较多的操作步骤和经验；而且，这些方法一次只检测一种猪病的抗体。可见，上述方法尽管检测特异或敏感，但操作不够简便与快速，均不适合基层或现场快速检测或诊断。因此，研究一种简便而快速的、可以检测这3种猪病病毒抗体的实时在线检测技术，非常重要而迫切。 

(三)、发明内容：

本发明要解决的技术问题是：针对现有技术不足，提出一种检测准确、快速、使用方便、成本低的一步检测一种或多种猪病毒性腹泻疾病抗体的试纸条。 

本发明的技术方案： 

一种检测一种或多种猪病毒性腹泻疾病抗体的试纸条，含有支撑层、反应试剂载体吸附层，支撑层为不吸水薄片条，反应试剂载体吸附层粘贴于支撑层上，反应试剂载体吸附层由样品端依次为测试端纤维层、吸附金标SPA蛋白或与待检抗体相应的金标抗原纤维层、纤维素膜层及手柄端的吸水材料层，在纤  维素膜层上含有一个用纯化的猪传染性胃肠炎病毒TGEV、猪流行性腹泻病毒PDEV和猪轮状病毒RV溶液中的任一种印制的检测印迹，或含有纯化的TGEV、PDEV和RV溶液中分别任选两种印制的检测印迹，或含有纯化的TGEV、PDEV和RV三种溶液任选一种排列顺序印制的检测印迹，纤维素膜层上还含有用羊或兔抗SPA蛋白的IgG溶液印制的对照印迹，或者含有用羊或兔抗猪传染性胃肠炎病毒TGEV的IgG溶液、抗猪流行性腹泻病毒PDEV的IgG溶液和抗猪轮状病毒RV的IgG溶液中的任一种或任两种或三种印制的对照印迹。 

与待检抗体相应的金标抗原为金标纯化猪传染性胃肠炎病毒TGEV、猪流行性腹泻病毒PDEV和猪轮状病毒RV中的任一种、或任两种、或全部，金标抗原的成分与纤维素膜层上的检测印迹所用的溶液成分对应，纤维素膜层上的羊或兔抗SPA蛋白的IgG与所述金标SPA蛋白对应，纤维素膜层上的羊或兔抗病毒的IgG与所述纤维素膜层上的检测印迹所用的溶液成分对应。 

支撑层用硬质塑胶片条，或不吸水的硬纸片条；测试端纤维层用玻璃棉，或尼龙纤维膜，或聚酯纤维膜；吸水材料层用吸水纸；纤维素膜层用硝酸纤维素膜，或纯纤维素膜，或羧化纤维素膜，或聚偏二氟乙烯纤维膜PVDF；吸附金标SPA蛋白或与待检抗体相应的金标抗原纤维层用玻璃棉，或尼龙纤维膜，或聚酯纤维膜。 

纤维素膜层上含有一条或个检测印迹时，一条或个检测印迹和对照印迹的排列形式为“||”、“＝”、“//”、“//”、“-|”、“|-”、“+”、“●●”、中的任一种；纤维素膜层上含有两条或个检测印迹时，两条或个检测印迹和对照印迹的排列形式为“|||”、“///”、“///”、“●●●”、中的任一种；纤维素膜层上含有三条或个检测印迹时，三条或个检测印迹和对照印迹的排列形式为“||||”、“////”、“////”、“●●●●”、中的任一种。 

纤维素膜层上依次含有用纯化的猪传染性胃肠炎病毒TGEV、猪流行性腹泻病毒PDEV和猪轮状病毒RV溶液中的任一种印制的直线式检测印迹“|”、用羊或兔抗SPA蛋白的IgG溶液或者用羊或兔抗猪传染性胃肠炎病毒TGEV的IgG  溶液/抗猪流行性腹泻病毒PDEV的IgG溶液/抗猪轮状病毒RV的IgG溶液中的任一种印制的直线式对照印迹“|”。