[发明专利]一种同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的检测卡

说明书

技术领域：

本发明涉及检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的检测器具，特别是一种同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的检测卡及其检测样品的处理方法。

背景技术：

真菌的寄生和真菌毒素的产生，严重影响农作物的产量，降低农产品、粮食、饲料品质，造成巨大经济损失。真菌毒素中尤以黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A对人体健康危害较大。

黄曲霉毒素(aflatoxins)是由生长在食物及饲料中的黄曲霉菌、曲霉菌等代谢产生的一组化学结构类似的真菌毒素。在天然污染的食品中以B1最多见，毒性最强。许多国家在玉米、花生及花生油、花生饼、花生酱、棉籽饼、山核桃、无花果、榛子、可可豆、杏仁、奶粉、牛奶、水牛奶、酸奶、奶酪、大米等都曾查出黄曲霉毒素。

黄曲霉毒素已被证明对动物的肝脏组织和器官具有很大的危害，急性中毒表现为发热、呕吐、食欲不振、黄疸，严重者出现腹水、下肢浮肿、肝大、脾大，常发生突然死亡。黄曲霉毒素对许多动物有强烈的致癌性，以肝癌为主。1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为1类致癌物，是一种毒性极强的剧毒物质。我国各种主要食品中黄曲霉毒素B1允许含量如下：玉米、花生、花生油、坚果和干果(核桃、杏仁)、玉米及花生仁制品不得超过20ppb。大米、其它食用油(香油、菜子油、大豆油、葵花油、胡麻油、茶油、麻油、米糠油、棉籽油)不得超过10ppb。其它粮食(麦类、面粉、薯干)、发酵食品(酱油、食用醋、豆豉、腐乳制品)不得超过5ppb。

赭曲霉毒素A是温暖地区最重要的仓贮毒素。主要污染谷物、豆类、麦类及玉米。赭曲霉毒素A(Ochratoxin A，OA)的危害主要表现为很强的肾脏毒性，并有致畸性和致癌性，人体摄入后主要导致肾脏病变，是一种慢性进行性疾病往往造成死亡。世界卫生组织建议(1991)，每公斤谷物及其产品中的一般最高限量是5微克。有些国家(包括丹麦和瑞典)也把这作为法定的最高限量。

目前，现有技术对于黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的检测主要依赖色谱和质谱技术，以及酶免疫检测试剂盒，也有单独检测黄曲霉毒素B1的检测卡，但到目前为止，没有同时检测这两种物质的检测器具。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种能同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的检测器具，克服现有技术只能逐一单独检查的缺陷。

本发明的技术方案是一种同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的检测卡及其检测样品的处理方法。黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A检测卡，它是在长条扁平薄壳状的检测卡外壳内设置测试条，检测卡外壳表面有检测窗孔和加样孔，其特征在于测试条是由支承背板上粘贴四种元件组成：支承背板中部粘贴硝酸纤维素膜，支承背板一端部上粘贴吸水膜，另一端部上粘贴样品垫，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜一端搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴一段胶体金膜，胶体金膜是含抗黄曲霉毒素B1和抗赭曲霉毒素A单克隆抗体或多克隆抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上横向有三条间隔开的显示印迹带，一条是含黄曲霉毒素B1蛋白质偶联物的检测带，另一条是含赭曲霉毒素A蛋白质偶联物的检测带，第三条是质孔带，含抗兔抗体或抗鼠抗体；测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗孔。

采用上述黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A检测卡，检测样品可以是大米、玉米、小麦、大豆、花生等粮食作物和加工的食品、食用油、以及发酵食品、婴儿代乳食品、饲料原料、配合饲料、中药原料和中成药等样品。

样品的处理方法是：取1克粉碎的固态样品或液态样品，加入含有3毫升样品抽提液的试管中，震荡混合反应10分钟。静置5分钟后，轻轻吸取上清液350ul，加入样品稀释液，混合后用于测定。

本发明的优点是能同时检测出大米、玉米、小麦、大豆、花生等粮食作物和加工的食品、食用油、以及发酵食品、婴儿代乳食品、饲料原料、配合饲料、中药原料和中成药等样品中含有的黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A，且节省检测费用，使用方便，检测快速，灵敏度高，结果准确。

附图说明：

图1是黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A检测卡外壳及测试条在外壳内的安置图。

图2是黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A检测卡的测试条结构示意图。

图3是测试条的硝酸纤维素膜上显示印迹带示意图。

本发明结合具体实施例参见附图进一步说明如下：