[发明专利]含有转录DNA结合位点的环状哑铃状诱饵寡脱氧核苷酸(CDODN)

说明书

本申请是申请日为2002年4月26日、申请号为02829221.9、发明名称为“含有转录DNA结合位点的环状哑铃状诱饵寡脱氧核苷酸(CDODN)”的发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及基因治疗领域，具体而言，涉及新的诱饵寡脱氧核苷酸及其用途。

背景技术

用于降低转录因子的反式活性(trans-activity)的双链寡脱氧核苷酸(ODN或“诱饵”)是基因治疗和对基因产物进行功能性研究的新的有吸引力的策略。一些不同的双链DNA结构，包括未修饰的寡核苷酸双链体、ab-anomeric oligonucleotide、硫代磷酸酯寡核苷酸双链体、和哑铃状寡核苷酸，已经被引入作为转录因子的诱饵(见Scholer HR和Gruss P.，Cell1984；36：403-411；Cereghini S等，Genes Dev 1988；2：957-974；BerkowitzLA等，Mol Cell Biol 1989；9：4272-4281；Tanaka H等，Nucleic Acids Res1994；22：3069-3074；Bielinska A等，Science 1990：250：997-1000；CluselC等，Nucleic Acids Res 1993：21：3405-3411：Lim CS等，Nucleic Acids Res1997；25：575-581；Hosoya T等，FEBS Lett 1999：461：136-140；Mann MJ和Dzau VJ J.Clin.Invest.2000：106：1071-1075)。

转染双链顺式元件诱饵ODN引起转录激活因子与同一序列的内源性顺式元件隔离，继而抑制基因表达(见Bielinska A等，1990见上；Morishita R等1998见上；以及Sawa Y，Morishita R，Suzuki K.，Circulation1997；96：II-280-11-285)。

此外，已经发现，施用抗NF-KB，c-myb，c-myc，cdc2，cdk2，E2F和CRE的反义或诱饵寡核苷酸，可分别降低恶病质(cachexia)(Kawamura I等，Gene Ther.1999：6：91-97)、实验性再狭窄的体外细胞增殖和内膜增厚(intimal thickening)(见Simons M等，Nature 1992；359：67-73；MorishitaR等，J Clin Invest1994：93：1458-1464：Morishita R等，Proc Natl Acad SciUSA 1993：90：8474-8478：Morishita R等，1995见上：Morishita R等，NatMed 1997；3：894-899：Kaneda Y和Morishita R，Jpn J Clin Pathol 1997：45：99-105：Tomita等，Am.J.Physiol.1998；275：F278-F284；Maeshima Y等，J.Clin.Invest.1998：101：2589-2597；Akimoto M等，Exp Eye Res.1998：67：395-401；Mann MJ等，Lancet，1999：354：1493-1498；Mann和Dzau 2000见上：Kawauchi M等，Circ.Res.2000：87：1063-1068；Mangi AA和DzauVJ，Ann Med 2001：33：153-155；Ehsan A等，J Thorac Cardiovasc Surg2001；121：714-722；Kawauchi M等，Transplant.Proc.2001：33：451：McCarthy M，Lancet，2001：358：1703)、抑制增殖性胆管炎(Yoshida M等，J.Surg.Res.2002：102：95-101)以及降低肿瘤生长并在癌症模型中诱导凋亡(Park YG等，J.Biol.Chem.1999：274：1573-80：Cho-Chung YS等，Mol.Cell.Biochem.2000：212：29-34：Alper O等，Mol.Cell.Biochem.2001：218：55-63)。