[发明专利]癌症唾液快速检测试剂

说明书

1.技术领域

本发明专利是涉及医学免疫诊断技术领域，特别是癌症的唾液检测试剂。

2.背景技术

(1)免疫胶体金技术是上世纪90年代发展起来的一种简便、快速、准确的检测技术，其原理与双夹心ELISA相似，不同的是使用胶体金结合蛋白质形成的复合物作为探针，且所使用的试剂事先都被固定在具有微孔的硝酸纤维素膜上。使用时将一端置于检测液中，硝酸纤维素膜可被液体穿过，若检测液中含有相关的抗原或抗体。在检测区就会出现淡红色线条。否则为阴性。该技术问世以来已在临床上不断被采用，该方法不依赖于精密的仪器、不依赖于熟练的技术人员、操作步骤简捷，比起目前常用的酶联免疫法具有更大的优点。整个反应过程约在5分钟内就可以完成。因而需要的样品量少，检测更为敏感和准确。建立上述快速、简便、特异的免疫分析方法。

在病毒和细菌等病原生物引起的传染病中，实验室诊断有着极重要的价值。实验室诊断又分为病原学诊断和血清学(即免疫学)诊断两大部分。前者虽具有确诊感染和疾病的优点，但检出效果很不理想。因此，免疫学诊断已成为许多传染病的主要检测手段。

当前国内外使用最广泛的血清学诊断方法为酶联免疫吸附试验(ELISA)，检测的目标物可为抗体、亦可为可溶性循环抗原。与既往使用的血清学诊断方法(如间接血凝试验、乳胶凝集试验、免疫荧光法和放射免疫试验等)相比较、该类方法具有敏感性强、特异性高、操作相对简便等优点。但该法操作步骤多、技术要求高、检测时间长达2～3小时，结果需借助仪器判读且结果无法保存。这些缺点限制了其在基层和现场的应用和推广，更无法直接进入家庭。

3.发明内容：本发明专利的目的在于公开一种结构简单，检测过程快速准确，应用层析法(Lateral Flow Immuno-Assay)胶体金免疫诊断技术的癌症唾液快速检测试剂。胶体金检测系统使用一种特殊的多孔膜(NC膜)作为固相抗原或抗体载体。该膜具有很强的蛋白吸附功能，抗原或抗体吸附于NC膜并经干燥处理后即作为固相，可与液相中的相应抗体或抗原快速结合。而在湿润状态下，液相(唾液)中含有的抗体或抗原可因“灯芯引流现象”作快速定向泳动并与固相抗原或抗体结合成为复合物；结合物载体上预先喷点的结合有胶体金(作为显色和指示剂)的相应第二抗体或抗原亦可与该复合物快速结合。由于毛细作用复合物沿纸条向前移动.移动至检测线处，复合物被抗人-IgG单克隆抗体捕获形成CEA抗体-抗人-IgG单克隆抗体夹心物，呈现出一条紫红色条带.阴性标本则不会形成夹心物.游离的胶体金标重组HIV抗原移动至对照线处被HIV单克隆抗体捕获呈现出一条紫红色条带.对照线的出现表明测试是有效的.

由于这种结合过程为物理过程，反应可在数分钟内完成且结合非常稳定。这一技术的创新点为：加有辅助剂使抗原或抗体与固相膜载体牢固结合；应用特殊干燥技术使与固相膜载体结合的蛋白保持稳定，从而达到试剂盒可在常温下保存18个月到1年；胶体金制备和结合技术；胶体金结合物的干燥和在常温下长期保存技术；测试条中各种参试组分的最佳配比；为达到整个测试反应在数分钟内一步完成对测试条中各种原材料的测试选定和参试组分的最佳配比。

4.具体实施方式

本发明是指一种测试唾液中癌胚抗原的专用检测试剂.癌坯抗原是癌和胚胎组织产生的一种糖蛋白，是世界上公认的肿瘤标志物之一，CEA的检测广泛用于消化道肿瘤的诊断及术后观察，在胃癌.口腔癌及癌前病变中唾液较血清升高明显.因此唾液CEA的检测对某些恶性肿瘤的早期诊断及普查有着临床价值.

1)操作步骤

a.用采样器取40μl待测微量唾液，加到测试纸条的加样处。随即滴加2滴样本稀释液，若一分钟后未见样本迁移至检测窗口，则需再加1滴样本稀释液。

b.加样后，阳性标本因其强弱不同可在1～20分钟内检出，20分钟后判读结果无效

2)结果判断

阳性：测试纸条在检测区和对照区位置出现紫红色条带，任何可见的紫红色条带只要在检测区出现，不论深浅均解释为阳性。

阴性：测试纸条只在对照线位置出现一条紫红色条带。

失效：对照区未出现紫红色条带或仅在检测区出现紫红色条带

表明不正确的操作过程或试剂盒已变质损坏。

3)试剂保存于4-30℃，避免冻结。有效期18个月.